Idées clés
On compte les bactéries en diluant une culture et en comptant les colonies, et elles croissent par doublement. Quelques formules transforment des comptages sur boîte en concentrations et des courbes de croissance en temps de génération.
- UFC par mL = colonies comptées ÷ (facteur de dilution × volume ensemencé en mL). Comptez les boîtes qui ont environ 30 à 300 colonies.
- Dans une dilution en série, les facteurs se multiplient : trois étapes de dix donnent 10⁻³.
- Le nombre de générations est n = log₂(N ÷ N₀), et le temps de génération est g = durée écoulée ÷ n.
- La croissance exponentielle a une constante de croissance k = ln 2 ÷ g, et N = N₀ × 2ⁿ donne le nombre après n générations.
Équations clés
CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)n = log₂(N ÷ N₀)g = t ÷ nk = ln 2 ÷ gtotal dilution = product of the steps
Exemple résolu
Une boîte de la dilution 10⁻⁶, avec 0,1 mL étalé, a 150 colonies, donc la culture contient 150 ÷ (10⁻⁶ × 0,1) = 1,5 × 10⁹ UFC/mL. Une culture qui passe de 1 × 10⁵ à 1,6 × 10⁶ cellules en 2 h a fait log₂(16) = 4 générations, donc g = 120 ÷ 4 = 30 min.
Erreurs fréquentes
- Oublier de diviser par le volume ensemencé, qui est souvent 0,1 mL et non 1 mL.
- Utiliser des boîtes avec trop peu ou trop de colonies, ce qui donne des comptages bruités ou saturés.
- Utiliser des logarithmes népériens pour le nombre de générations sans diviser par ln 2.
Pratique
Testez-vous avec des questions d’entraînement sur ce thème : Croissance et dénombrement microbiens