मुख्य विचार
जीवाणुओं को संवर्ध तनु करके और कॉलोनियाँ गिनकर गिना जाता है, और वे दोगुने होकर बढ़ते हैं। कुछ सूत्र प्लेट गणना को सांद्रता में और वृद्धि वक्र को पीढ़ी काल में बदलते हैं।
- CFU प्रति mL = गिनी गई कॉलोनियाँ ÷ (तनुकरण गुणक × फैलाया गया आयतन mL में)। लगभग 30 से 300 कॉलोनी वाली प्लेटें गिनें।
- क्रमिक तनुकरण में गुणक गुणा होते हैं: दस गुना के तीन चरण 10⁻³ देते हैं।
- पीढ़ियों की संख्या n = log₂(N ÷ N₀) है, और पीढ़ी काल g = बीता समय ÷ n है।
- चरघातांकी वृद्धि का वृद्धि स्थिरांक k = ln 2 ÷ g है, और N = N₀ × 2ⁿ n पीढ़ियों के बाद की संख्या देता है।
मुख्य समीकरण
CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)n = log₂(N ÷ N₀)g = t ÷ nk = ln 2 ÷ gtotal dilution = product of the steps
हल किया हुआ उदाहरण
10⁻⁶ तनुकरण की प्लेट पर 0.1 mL फैलाने से 150 कॉलोनियाँ आती हैं, इसलिए संवर्ध में 150 ÷ (10⁻⁶ × 0.1) = 1.5 × 10⁹ CFU/mL है। जो संवर्ध 2 h में 1 × 10⁵ से 1.6 × 10⁶ कोशिकाओं तक बढ़ा, उसने log₂(16) = 4 पीढ़ियाँ पूरी कीं, इसलिए g = 120 ÷ 4 = 30 min।
आम गलतियाँ
- फैलाए गए आयतन से भाग देना भूल जाना, जो प्रायः 1 mL नहीं 0.1 mL होता है।
- बहुत कम या बहुत अधिक कॉलोनी वाली प्लेटें लेना, जिससे गणना अविश्वसनीय या भीड़ भरी होती है।
- पीढ़ियों की संख्या के लिए ln 2 से भाग दिए बिना प्राकृतिक लघुगणक लगाना।
अभ्यास
इस विषय के अभ्यास प्रश्नों से खुद को परखें: सूक्ष्मजीव वृद्धि और गणना