Ideias principais
As bactérias são contadas diluindo uma cultura e contando colônias, e crescem por duplicação. Algumas fórmulas transformam contagens em placa em concentrações e curvas de crescimento em tempos de geração.
- UFC por mL = colônias contadas ÷ (fator de diluição × volume semeado em mL). Conte placas com cerca de 30 a 300 colônias.
- Numa diluição seriada os fatores se multiplicam: três passos de dez dão 10⁻³.
- O número de gerações é n = log₂(N ÷ N₀), e o tempo de geração é g = tempo decorrido ÷ n.
- O crescimento exponencial tem constante de crescimento k = ln 2 ÷ g, e N = N₀ × 2ⁿ dá a contagem após n gerações.
Equações principais
CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)n = log₂(N ÷ N₀)g = t ÷ nk = ln 2 ÷ gtotal dilution = product of the steps
Exemplo resolvido
Uma placa da diluição 10⁻⁶, com 0,1 mL semeados, tem 150 colônias, então a cultura contém 150 ÷ (10⁻⁶ × 0,1) = 1,5 × 10⁹ UFC/mL. Uma cultura que cresce de 1 × 10⁵ para 1,6 × 10⁶ células em 2 h fez log₂(16) = 4 gerações, então g = 120 ÷ 4 = 30 min.
Erros comuns
- Esquecer de dividir pelo volume semeado, que costuma ser 0,1 mL e não 1 mL.
- Usar placas com poucas ou muitas colônias, o que dá contagens ruidosas ou saturadas.
- Usar logaritmos naturais para o número de gerações sem dividir por ln 2.
Prática
Teste-se com perguntas de prática sobre este tema: Crescimento e contagem microbiana