Ideias principais
As enzimas aceleram as reações ao reduzir a energia de ativação, e a equação de Michaelis–Menten descreve como a velocidade depende da concentração de substrato. Os inibidores mudam o quadro de forma previsível.
- Michaelis–Menten: v = Vmáx[S] ÷ (Km + [S]). Quando [S] = Km a velocidade é exatamente metade de Vmáx, então Km mede quão forte o substrato se liga (Km menor, ligação mais forte).
- Com [S] muito alta a enzima satura e v se aproxima de Vmáx. O número de renovação é kcat = Vmáx ÷ [E], o número de moléculas de substrato que uma enzima converte por segundo.
- Um inibidor competitivo compete com o substrato: Vmáx não muda e Km parece maior. Um inibidor não competitivo reduz Vmáx e deixa Km inalterado.
- Temperatura e pH mudam as velocidades, e extremos desnaturam a enzima. A concentração de uma proteína pode ser medida por sua absorbância a 280 nm.
Equações principais
v = Vmax[S] ÷ (Km + [S])kcat = Vmax ÷ [E]A = εclat [S] = Km, v = Vmax ÷ 2
Exemplo resolvido
Uma enzima tem Vmáx = 100 µmol/min e Km = 2 mM. Com [S] = 6 mM, v = 100 × 6 ÷ (2 + 6) = 75 µmol/min, e com [S] = 2 mM é 50 µmol/min. Se 0,010 µmol de enzima deram esse Vmáx, kcat = 100 ÷ 0,010 = 10 000 min⁻¹, ou cerca de 167 s⁻¹.
Erros comuns
- Achar que Km é a concentração de substrato que dá Vmáx. Ela dá metade de Vmáx.
- Dizer que um inibidor competitivo reduz Vmáx. Ele é superado com mais substrato, então Vmáx não muda.
- Tomar uma velocidade que se estabilizou como sinal de que a enzima foi destruída. Ela está saturada, não desnaturada.
Prática
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