মূল ধারণা
ব্যাকটেরিয়া গোনা হয় কালচার লঘু করে ও কলোনি গুনে, এবং তারা দ্বিগুণ হয়ে বাড়ে। কয়েকটি সূত্র প্লেটের গণনাকে ঘনমাত্রায় এবং বৃদ্ধির রেখাকে প্রজন্ম সময়ে বদলায়।
- CFU প্রতি mL = গোনা কলোনি ÷ (লঘুকরণ গুণক × ছড়ানো আয়তন mL-এ)। প্রায় 30 থেকে 300 কলোনির প্লেট গুনুন।
- ক্রমিক লঘুকরণে গুণক গুণ হয়: দশ গুণের তিন ধাপে 10⁻³।
- প্রজন্মের সংখ্যা n = log₂(N ÷ N₀) এবং প্রজন্ম সময় g = অতিক্রান্ত সময় ÷ n।
- সূচকীয় বৃদ্ধির বৃদ্ধি ধ্রুবক k = ln 2 ÷ g, এবং N = N₀ × 2ⁿ n প্রজন্ম পরের সংখ্যা দেয়।
মূল সমীকরণ
CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)n = log₂(N ÷ N₀)g = t ÷ nk = ln 2 ÷ gtotal dilution = product of the steps
সমাধান করা উদাহরণ
10⁻⁶ লঘুকরণের প্লেটে 0.1 mL ছড়ালে 150টি কলোনি হলে কালচারে 150 ÷ (10⁻⁶ × 0.1) = 1.5 × 10⁹ CFU/mL আছে। 2 h-এ 1 × 10⁵ থেকে 1.6 × 10⁶ কোষে বাড়া কালচার log₂(16) = 4 প্রজন্ম পার করেছে, তাই g = 120 ÷ 4 = 30 মিনিট।
সাধারণ ভুল
- ছড়ানো আয়তন দিয়ে ভাগ করতে ভুলে যাওয়া, যা প্রায়ই 1 mL নয়, 0.1 mL।
- খুব কম বা খুব বেশি কলোনির প্লেট ব্যবহার করা, যাতে গণনা অনির্ভরযোগ্য বা ঠাসা হয়।
- প্রজন্মের সংখ্যার জন্য ln 2 দিয়ে ভাগ না করে স্বাভাবিক লগারিদম ব্যবহার করা।
অনুশীলন
এই বিষয়ের অনুশীলন প্রশ্ন দিয়ে নিজেকে যাচাই করুন: অণুজীবের বৃদ্ধি ও গণনা