Ideas clave
Las bacterias se cuentan diluyendo un cultivo y contando colonias, y crecen duplicándose. Unas pocas fórmulas convierten recuentos en placa en concentraciones y curvas de crecimiento en tiempos de generación.
- UFC por mL = colonias contadas ÷ (factor de dilución × volumen sembrado en mL). Cuenta placas con unas 30 a 300 colonias.
- En una dilución seriada los factores se multiplican: tres pasos de diez dan 10⁻³.
- El número de generaciones es n = log₂(N ÷ N₀), y el tiempo de generación es g = tiempo transcurrido ÷ n.
- El crecimiento exponencial tiene una constante de crecimiento k = ln 2 ÷ g, y N = N₀ × 2ⁿ da el recuento tras n generaciones.
Ecuaciones clave
CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)n = log₂(N ÷ N₀)g = t ÷ nk = ln 2 ÷ gtotal dilution = product of the steps
Ejemplo resuelto
Una placa de la dilución 10⁻⁶, con 0,1 mL sembrados, tiene 150 colonias, así que el cultivo contiene 150 ÷ (10⁻⁶ × 0,1) = 1,5 × 10⁹ UFC/mL. Un cultivo que crece de 1 × 10⁵ a 1,6 × 10⁶ células en 2 h hizo log₂(16) = 4 generaciones, así que g = 120 ÷ 4 = 30 min.
Errores comunes
- Olvidar dividir por el volumen sembrado, que suele ser 0,1 mL y no 1 mL.
- Usar placas con muy pocas o demasiadas colonias, lo que da recuentos ruidosos o saturados.
- Usar logaritmos naturales para el número de generaciones sin dividir por ln 2.
Práctica
Ponte a prueba con preguntas de práctica sobre este tema: Crecimiento y recuento microbiano