نمو الكائنات الدقيقة وعدّها: دليل دراسة

الأفكار الأساسية

تُعدّ البكتيريا بتخفيف مزرعة وعدّ المستعمرات، وتنمو بالانقسام إلى اثنين. تحوّل بضع صيغ عدّ الأطباق إلى تراكيز ومنحنيات النمو إلى أزمنة جيل.

• CFU لكل mL = المستعمرات المعدودة ÷ (عامل التخفيف × الحجم المنشور بالمل). عدّ الأطباق التي فيها نحو 30 إلى 300 مستعمرة.
• في التخفيف المتسلسل تُضرب العوامل: ثلاث خطوات من عشرة تعطي 10⁻³.
• عدد الأجيال n = log₂(N ÷ N₀) وزمن الجيل g = الزمن المنقضي ÷ n.
• للنمو الأسي ثابت نمو k = ln 2 ÷ g، ويعطي N = N₀ × 2ⁿ العدد بعد n جيلاً.

المعادلات الأساسية

• CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)
• n = log₂(N ÷ N₀)
• g = t ÷ n
• k = ln 2 ÷ g
• total dilution = product of the steps

مثال محلول

طبق من تخفيف 10⁻⁶ نُشر عليه 0.1 mL فيه 150 مستعمرة، فيحوي المزرعة 150 ÷ (10⁻⁶ × 0.1) = 1.5 × 10⁹ CFU/mL. ومزرعة نمت من 1 × 10⁵ إلى 1.6 × 10⁶ خلية في 2 h مرّت بـ log₂(16) = 4 أجيال فيكون g = 120 ÷ 4 = 30 دقيقة.

أخطاء شائعة

• نسيان القسمة على الحجم المنشور وهو غالباً 0.1 mL لا 1 mL.
• استعمال أطباق فيها مستعمرات قليلة جداً أو كثيرة جداً فيكون العدّ مضطرباً أو مزدحماً.
• استعمال اللوغاريتم الطبيعي لعدد الأجيال دون القسمة على ln 2.

تدرّب

اختبر نفسك بأسئلة تدريبية في هذا الموضوع: نمو الكائنات الدقيقة وعدّها