Pertumbuhan dan penghitungan mikroba: panduan belajar

Gagasan utama

Bakteri dihitung dengan mengencerkan biakan dan menghitung koloni, dan tumbuh dengan membelah dua. Beberapa rumus mengubah hitungan cawan menjadi konsentrasi dan kurva pertumbuhan menjadi waktu generasi.

• CFU per mL = koloni terhitung ÷ (faktor pengenceran × volume yang ditebar dalam mL). Hitung cawan dengan sekitar 30 sampai 300 koloni.
• Pada pengenceran berseri faktor dikalikan: tiga langkah sepuluh kali menghasilkan 10⁻³.
• Jumlah generasi adalah n = log₂(N ÷ N₀), dan waktu generasi adalah g = waktu yang berlalu ÷ n.
• Pertumbuhan eksponensial memiliki tetapan pertumbuhan k = ln 2 ÷ g, dan N = N₀ × 2ⁿ memberi jumlah setelah n generasi.

Persamaan penting

• CFU/mL = colonies ÷ (dilution × volume plated)
• n = log₂(N ÷ N₀)
• g = t ÷ n
• k = ln 2 ÷ g
• total dilution = product of the steps

Contoh soal

Cawan pengenceran 10⁻⁶ dengan 0,1 mL yang ditebar memiliki 150 koloni, sehingga biakan mengandung 150 ÷ (10⁻⁶ × 0,1) = 1,5 × 10⁹ CFU/mL. Biakan yang tumbuh dari 1 × 10⁵ menjadi 1,6 × 10⁶ sel dalam 2 jam menjalani log₂(16) = 4 generasi, sehingga g = 120 ÷ 4 = 30 menit.

Kesalahan umum

• Lupa membagi dengan volume yang ditebar, yang sering 0,1 mL, bukan 1 mL.
• Memakai cawan dengan koloni terlalu sedikit atau terlalu banyak, yang menghasilkan hitungan galat atau padat.
• Memakai logaritma natural untuk jumlah generasi tanpa membagi dengan ln 2.

Latihan

Uji dirimu dengan soal latihan tentang topik ini: Pertumbuhan dan penghitungan mikroba