মূল ধারণা
জৈব ল্যাবরেটরির কাজ হল একটি যৌগ তৈরি করা এবং তারপর তা বিশুদ্ধ করা ও যাচাই করা। ক্রোমাটোগ্রাফি, পুনঃস্ফটিকীকরণ, পাতন, নিষ্কাশন ও গলনাঙ্ক পরিমাপ প্রমিত পদ্ধতি, প্রতিটির একটি সহজ হিসাব আছে।
- পাতলা স্তর ক্রোমাটোগ্রাফিতে Rf = দাগের অতিক্রান্ত দূরত্ব ÷ দ্রাবকের সম্মুখভাগের অতিক্রান্ত দূরত্ব। এটি সবসময় 0 ও 1-এর মধ্যে এবং যৌগের পোলারতার উপর নির্ভর করে।
- পুনঃস্ফটিকীকরণ কঠিন পদার্থকে বিশুদ্ধ করে। শতকরা পুনরুদ্ধার = পুনরুদ্ধার ভর ÷ অশোধিত কঠিনের ভর × 100, এবং তা কখনও 100 % হয় না।
- পাতন তরলগুলোকে স্ফুটনাঙ্ক দিয়ে আলাদা করে, পার্থক্য প্রায় 25 °C-এর বেশি হলে সরল এবং কাছাকাছি হলে আংশিক পাতন।
- বিশুদ্ধ কঠিন নির্দিষ্ট তাপমাত্রায় তীক্ষ্ণভাবে গলে, আর অপদ্রব্য গলন পরিসর কমায় ও চওড়া করে। কয়েকটি ছোট নিষ্কাশন একটি বড়টির চেয়ে বেশি বের করে।
মূল সমীকরণ
Rf = distance of spot ÷ distance of solvent frontpercent recovery = recovered ÷ crude × 100fraction left = (1 ÷ (1 + K·V₂/V₁))ⁿpercent yield = actual ÷ theoretical × 100
সমাধান করা উদাহরণ
দ্রাবকের সম্মুখভাগ 8.0 cm যাওয়ার সময় একটি দাগ 3.2 cm গেলে Rf = 0.40। 2.00 g অশোধিত কঠিন পুনঃস্ফটিকীকরণ করে 1.60 g বিশুদ্ধ কেলাস পেলে পুনরুদ্ধার 80 %। কোনো যৌগের ইথার ও পানির মধ্যে K = 3 হলে 100 mL পানি থেকে 100 mL ইথার দিয়ে একবার নিষ্কাশনে 75 % বের হয়। 50 mL করে দুইবার নিষ্কাশনে (1 ÷ (1 + 3 × 0.5))² = 0.16 থাকে, তাই 84 % বের হয়।
সাধারণ ভুল
- Rf-কে ভিত্তি রেখা থেকে ভুল বিন্দু পর্যন্ত মাপা। দাগের কেন্দ্র ও সম্মুখভাগের অবস্থান নিন।
- পুনঃস্ফটিকীকরণে অনেক বেশি গরম দ্রাবক নেওয়া। এতে উৎপাদ দ্রবীভূত থাকে এবং পুনরুদ্ধার কমে।
- ভাবা যে চওড়া ও নিম্ন গলন পরিসর বেশি বিশুদ্ধ নমুনা বোঝায়। এটি অপদ্রব্য বোঝায়।
অনুশীলন
এই বিষয়ের অনুশীলন প্রশ্ন দিয়ে নিজেকে যাচাই করুন: পরীক্ষাগার কৌশল