Was die IC50 ist
Die IC50 (halbmaximale Hemmkonzentration) ist die Konzentration eines Wirkstoffs oder Inhibitors, die eine Antwort wie Enzymaktivität oder Zellviabilität auf die Mitte zwischen ihrem oberen und unteren Niveau senkt. Bei einer Antwort, die mit der Konzentration steigt, heißt derselbe Punkt EC50.
Das Experiment planen
- Teste 8 bis 12 Konzentrationen in gleichen logarithmischen Abständen, etwa in Dreier- oder Zehnerschritten, damit Punkte auf beiden Plateaus und in der Mitte liegen.
- Nimm eine unbehandelte Kontrolle (100 %) und eine Kontrolle für volle Hemmung oder Hintergrund (0 %) mit.
- Miss jede Konzentration in Replikaten.
Die Daten normieren
Rechne jeden Messwert in Prozent der Kontrollen um:
% Antwort = (Messwert − Hintergrund) ÷ (unbehandelt − Hintergrund) × 100
Die Kurve anpassen
Dosis-Wirkungs-Daten bilden gegen die logarithmierte Konzentration eine S-Kurve, die mit dem logistischen Vier-Parameter-Modell angepasst wird:
Antwort = Minimum + (Maximum − Minimum) ÷ (1 + 10(log IC50 − log Konzentration) × Hill-Koeffizient)
Die Anpassung findet oberes und unteres Plateau, die IC50 im Wendepunkt und den Hill-Koeffizienten, der die Steilheit beschreibt. Erreichen deine Daten kein Plateau, macht es die Anpassung stabiler, nach dem Normieren das Maximum auf 100 und das Minimum auf 0 festzulegen.
Das Ergebnis lesen
- IC50: Ein niedrigerer Wert bedeutet eine wirksamere Substanz.
- Hill-Koeffizient: etwa −1 bei einer einfachen fallenden Kurve. Deutlich steilere oder flachere Werte verdienen einen zweiten Blick.
- R² und Grafik: Die Kurve sollte durch die Punkte laufen, ohne systematisch daneben zu liegen.
- Eine IC50 außerhalb des getesteten Bereichs ist extrapoliert und sollte mit weiteren Konzentrationen bestätigt werden.
Rechner
Der IC50-Rechner passt die Vier-Parameter-Kurve an deine Replikate an, zeichnet sie und gibt IC50 oder EC50, Hill-Koeffizient, Plateaus und R² aus. Plane die Konzentrationen mit dem Verdünnungsreihen-Rechner.