IC50 क्या है
IC50 (आधा-अधिकतम अवरोधक सांद्रता) किसी दवा या अवरोधक की वह सांद्रता है जो एंज़ाइम गतिविधि या कोशिका जीवनक्षमता जैसी प्रतिक्रिया को उसके ऊपरी और निचले स्तर के ठीक बीच तक घटा देती है। सांद्रता के साथ बढ़ने वाली प्रतिक्रिया में यही बिंदु EC50 कहलाता है।
प्रयोग की योजना
- लॉग पैमाने पर बराबर दूरी वाली 8 से 12 सांद्रताएँ जाँचें, जैसे 3 या 10 गुना के क़दम, ताकि दोनों पठारों और बीच में बिंदु हों।
- बिना उपचार वाला नियंत्रण (100%) और पूरे अवरोध या बैकग्राउंड का नियंत्रण (0%) रखें।
- हर सांद्रता प्रतिकृतियों में मापें।
डेटा सामान्यीकृत करना
हर रीडिंग को नियंत्रणों के प्रतिशत में बदलें:
% प्रतिक्रिया = (रीडिंग − बैकग्राउंड) ÷ (बिना उपचार − बैकग्राउंड) × 100
कर्व फ़िट करना
डोज़-रिस्पॉन्स डेटा लॉग सांद्रता के सामने S-आकार की कर्व बनाता है, जिसे चार-पैरामीटर लॉजिस्टिक मॉडल से फ़िट किया जाता है:
प्रतिक्रिया = न्यूनतम + (अधिकतम − न्यूनतम) ÷ (1 + 10(log IC50 − log सांद्रता) × हिल ढलान)
फ़िट ऊपरी और निचले पठार, बीच के बिंदु पर IC50 और ढलान बताने वाली हिल ढलान निकालता है। अगर डेटा पठार तक नहीं पहुँचता, तो सामान्यीकरण के बाद अधिकतम 100 और न्यूनतम 0 पर स्थिर करने से फ़िट ज़्यादा स्थिर होता है।
नतीजा पढ़ना
- IC50: कम मान का मतलब ज़्यादा असरदार यौगिक।
- हिल ढलान: सादी घटती कर्व में लगभग −1। बहुत तीखी या बहुत धीमी ढलान दोबारा देखने लायक़ है।
- R² और ग्राफ़: कर्व बिंदुओं के बीच से गुज़रनी चाहिए, किसी तय दिशा में चूके बिना।
- जाँची गई सीमा से बाहर का IC50 एक्सट्रपोलेशन है, जिसे और सांद्रताओं से पक्का करना चाहिए।
कैलकुलेटर
IC50 कैलकुलेटर आपकी प्रतिकृतियों पर चार-पैरामीटर कर्व फ़िट करता है, उसे बनाता है और IC50 या EC50, हिल ढलान, पठार और R² देता है। सांद्रताओं की योजना सीरियल डाइल्यूशन कैलकुलेटर से बनाएँ।