Apa itu IC50
IC50 (konsentrasi hambat setengah maksimal) adalah konsentrasi obat atau inhibitor yang menurunkan suatu respons, seperti aktivitas enzim atau viabilitas sel, sampai ke tengah antara tingkat atas dan bawahnya. Untuk respons yang naik seiring konsentrasi, titik yang sama disebut EC50.
Merancang percobaan
- Uji 8 sampai 12 konsentrasi berjarak sama pada skala log, misalnya kelipatan 3 atau 10, agar kurva punya titik di kedua plato dan di tengah.
- Sertakan kontrol tanpa perlakuan (100%) dan kontrol hambatan penuh atau latar (0%).
- Ukur tiap konsentrasi dalam ulangan.
Menormalisasi data
Ubah tiap pembacaan menjadi persen kontrol:
% respons = (pembacaan − latar) ÷ (tanpa perlakuan − latar) × 100
Mencocokkan kurva
Data dosis-respons membentuk kurva S terhadap log konsentrasi, yang dicocokkan dengan model logistik empat parameter:
respons = minimum + (maksimum − minimum) ÷ (1 + 10(log IC50 − log konsentrasi) × kemiringan Hill)
Pencocokan mencari plato atas dan bawah, IC50 di titik tengah, dan kemiringan Hill yang menggambarkan kecuraman. Jika data tidak mencapai plato, menetapkan maksimum 100 dan minimum 0 setelah normalisasi membuat pencocokan lebih stabil.
Membaca hasil
- IC50: nilai lebih rendah berarti senyawa lebih poten.
- Kemiringan Hill: sekitar −1 untuk kurva turun sederhana. Kemiringan yang jauh lebih curam atau landai patut ditinjau lagi.
- R² dan grafik: kurva harus melewati titik-titik tanpa pola meleset yang sistematis.
- IC50 di luar rentang yang diuji adalah ekstrapolasi dan perlu dipastikan dengan konsentrasi tambahan.
Kalkulator
Kalkulator IC50 mencocokkan kurva empat parameter ke ulangan Anda, menggambarnya, dan memberi IC50 atau EC50, kemiringan Hill, plato, dan R². Rencanakan konsentrasinya dengan kalkulator pengenceran bertingkat.