Apa arti MOI
Multiplisitas infeksi (MOI) adalah jumlah partikel virus infeksius yang ditambahkan per sel. MOI 5 pada 200.000 sel berarti menambahkan 1.000.000 unit infeksius.
Rumusnya
Volume virus (mL) = MOI × jumlah sel ÷ titer (unit infeksius per mL)
Untuk 200.000 sel pada MOI 5 dengan titer 1 × 108 per mL: 5 × 200.000 ÷ 108 = 0,01 mL = 10 µL.
Hitung sel pada hari infeksi, karena sel terus membelah setelah ditanam, dan pakai titer yang diukur sesuai cara virus menginfeksi (PFU untuk virus pembentuk plak, unit transduksi untuk lentivirus). Titer fisik seperti salinan genom atau p24 ikut menghitung partikel yang tidak infeksius sehingga melebih-lebihkan dosis infeksius.
Berapa banyak sel yang terinfeksi
Partikel virus mengenai sel secara acak, mengikuti distribusi Poisson. Bagian sel yang terinfeksi setidaknya sekali adalah 1 − e−MOI:
- MOI 0,1: sekitar 10% sel
- MOI 1: sekitar 63%
- MOI 3: sekitar 95%
- MOI 5: sekitar 99%
Jadi MOI 1 tidak menginfeksi semua sel; untuk menjangkau hampir semuanya diperlukan MOI 3 sampai 5.
MOI mana yang dipakai
- Untuk menginfeksi hampir semua sel, misalnya kurva pertumbuhan satu tahap: MOI 3 sampai 10.
- Untuk skrining pustaka gabungan, di mana tiap sel sebaiknya membawa satu konstruk: sekitar 0,3, sehingga hanya sekitar seperempat sel yang terinfeksi, tetapi sekitar 86% di antaranya menerima satu salinan.
- Untuk kurva pertumbuhan multi-tahap, di mana virus menyebar ke seluruh kultur: 0,01 sampai 0,1.
Kalkulator
Kalkulator MOI memberi volume virus untuk suatu MOI, atau MOI untuk suatu volume, beserta perkiraan bagian sel yang terinfeksi. Untuk menghitung sel lebih dulu, pakai kalkulator hemositometer.