Como calcular a MOI de uma infecção viral

O que significa MOI

A multiplicidade de infecção (MOI) é o número de partículas virais infecciosas adicionadas por célula. Uma MOI de 5 sobre 200.000 células significa adicionar 1.000.000 de unidades infecciosas.

A fórmula

Volume de vírus (mL) = MOI × número de células ÷ título (unidades infecciosas por mL)

Para 200.000 células a MOI 5 com título de 1 × 10⁸ por mL: 5 × 200.000 ÷ 10⁸ = 0,01 mL = 10 µL.

Conte as células no dia da infecção, porque elas continuam se dividindo depois de semeadas, e use um título medido do jeito que o vírus infecta (UFP para vírus que formam placas, unidades de transdução para lentivírus). Títulos físicos, como cópias genômicas ou p24, contam também partículas não infecciosas e superestimam a dose infecciosa.

Quantas células são infectadas

As partículas caem nas células ao acaso, seguindo a distribuição de Poisson. A parcela de células infectadas pelo menos uma vez é 1 − e^−MOI:

MOI 0,1: cerca de 10% das células
MOI 1: cerca de 63%
MOI 3: cerca de 95%
MOI 5: cerca de 99%

Ou seja, uma MOI de 1 não infecta todas as células; para chegar a quase todas é preciso uma MOI de 3 a 5.

Qual MOI usar

Para infectar quase todas as células, como numa curva de crescimento de um ciclo: MOI de 3 a 10.
Para triagens de bibliotecas em pool, em que cada célula deve receber um só construto: cerca de 0,3, de modo que só um quarto das células é infectado, mas cerca de 86% delas recebe uma única cópia.
Para curvas de crescimento de vários ciclos, em que o vírus se espalha pela cultura: de 0,01 a 0,1.

Calculadoras

A calculadora de MOI dá o volume de vírus para uma MOI, ou a MOI para um volume, com a parcela esperada de células infectadas. Para contar as células antes, use a calculadora de hemocitômetro.

Ferramentas deste guia

Calculadora de MOI Calculadora de hemocitômetro

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