MOI का मतलब
संक्रमण बहुलता (MOI) प्रति कोशिका डाले गए संक्रामक वायरस कणों की संख्या है। 200,000 कोशिकाओं पर MOI 5 का मतलब 1,000,000 संक्रामक इकाइयाँ डालना है।
सूत्र
वायरस का आयतन (mL) = MOI × कोशिकाओं की संख्या ÷ टाइटर (प्रति mL संक्रामक इकाइयाँ)
200,000 कोशिकाओं, MOI 5 और 1 × 108 प्रति mL टाइटर के लिए: 5 × 200,000 ÷ 108 = 0.01 mL = 10 µL।
कोशिकाएँ संक्रमण वाले दिन गिनें, क्योंकि सीडिंग के बाद भी वे बँटती रहती हैं, और वही टाइटर लें जो वायरस के संक्रमण के तरीके से मापा गया हो (प्लाक बनाने वाले वायरस के लिए PFU, लेंटीवायरस के लिए ट्रांसड्यूसिंग इकाइयाँ)। जीनोम कॉपी या p24 जैसे भौतिक टाइटर गैर-संक्रामक कण भी गिनते हैं और संक्रामक खुराक को बढ़ाकर दिखाते हैं।
कितनी कोशिकाएँ संक्रमित होती हैं
वायरस कण कोशिकाओं पर बेतरतीब गिरते हैं, जो पॉइसन वितरण का पालन करता है। कम से कम एक बार संक्रमित कोशिकाओं का हिस्सा 1 − e−MOI है:
- MOI 0.1: लगभग 10% कोशिकाएँ
- MOI 1: लगभग 63%
- MOI 3: लगभग 95%
- MOI 5: लगभग 99%
यानी MOI 1 हर कोशिका को संक्रमित नहीं करता; लगभग सभी तक पहुँचने के लिए MOI 3 से 5 चाहिए।
कौन-सा MOI इस्तेमाल करें
- लगभग हर कोशिका को संक्रमित करने के लिए, जैसे वन-स्टेप ग्रोथ कर्व: MOI 3 से 10।
- पूल्ड लाइब्रेरी स्क्रीन के लिए, जहाँ हर कोशिका में एक ही कंस्ट्रक्ट हो: लगभग 0.3। इससे केवल लगभग एक-चौथाई कोशिकाएँ संक्रमित होती हैं, लेकिन उनमें से लगभग 86% को एक ही कॉपी मिलती है।
- मल्टी-स्टेप ग्रोथ कर्व के लिए, जहाँ वायरस कल्चर में फैलता है: 0.01 से 0.1।
कैलकुलेटर
MOI कैलकुलेटर किसी MOI के लिए वायरस का आयतन, या किसी आयतन से MOI, संक्रमित कोशिकाओं के अनुमानित हिस्से के साथ देता है। पहले कोशिकाएँ गिनने के लिए हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटर इस्तेमाल करें।