Qué significa la MOI
La multiplicidad de infección (MOI) es el número de partículas virales infecciosas añadidas por célula. Una MOI de 5 sobre 200 000 células significa añadir 1 000 000 de unidades infecciosas.
La fórmula
Volumen de virus (mL) = MOI × número de células ÷ título (unidades infecciosas por mL)
Para 200 000 células a MOI 5 con un título de 1 × 108 por mL: 5 × 200 000 ÷ 108 = 0,01 mL = 10 µL.
Cuenta las células el día de la infección, porque siguen dividiéndose después de sembrarlas, y usa un título medido según cómo infecta el virus (UFP para virus que forman placas, unidades de transducción para lentivirus). Los títulos físicos, como copias genómicas o p24, cuentan también partículas no infecciosas y sobrestiman la dosis infecciosa.
Cuántas células se infectan
Las partículas caen sobre las células al azar, según la distribución de Poisson. La proporción de células infectadas al menos una vez es 1 − e−MOI:
- MOI 0,1: cerca del 10% de las células
- MOI 1: cerca del 63%
- MOI 3: cerca del 95%
- MOI 5: cerca del 99%
Así que una MOI de 1 no infecta todas las células; para llegar a casi todas hace falta una MOI de 3 a 5.
Qué MOI usar
- Para infectar casi todas las células, como en una curva de crecimiento de un solo ciclo: MOI de 3 a 10.
- Para cribados de bibliotecas en conjunto, donde cada célula debe llevar una sola construcción: cerca de 0,3, de modo que solo se infecta una cuarta parte de las células, pero cerca del 86% de ellas recibe una sola copia.
- Para curvas de crecimiento de varios ciclos, donde el virus se extiende por el cultivo: de 0,01 a 0,1.
Calculadoras
La calculadora de MOI da el volumen de virus para una MOI, o la MOI para un volumen, con la proporción esperada de células infectadas. Para contar antes las células, usa la calculadora de hemocitómetro.