MOI란
감염 다중도(MOI)는 세포 하나당 넣는 감염성 바이러스 입자의 수입니다. 200,000개 세포에 MOI 5로 감염시키려면 1,000,000 감염 단위를 넣습니다.
공식
바이러스 부피 (mL) = MOI × 세포 수 ÷ 역가(mL당 감염 단위)
세포 200,000개, MOI 5, 역가 1 × 108/mL이면 5 × 200,000 ÷ 108 = 0.01 mL = 10 µL입니다.
세포는 분주 후에도 계속 분열하므로 감염 당일에 세고, 역가는 바이러스의 감염 방식에 맞게 잰 값(플라크를 만드는 바이러스는 PFU, 렌티바이러스는 형질도입 단위)을 씁니다. 게놈 복제 수나 p24 같은 물리적 역가는 비감염성 입자까지 세므로 감염량을 과대평가합니다.
얼마나 많은 세포가 감염되나
바이러스 입자는 무작위로 세포에 닿으며 푸아송 분포를 따릅니다. 한 번 이상 감염되는 세포의 비율은 1 − e−MOI입니다.
- MOI 0.1: 세포의 약 10%
- MOI 1: 약 63%
- MOI 3: 약 95%
- MOI 5: 약 99%
즉 MOI 1로는 모든 세포가 감염되지 않으며, 거의 모두를 감염시키려면 MOI 3~5가 필요합니다.
어떤 MOI를 쓸까
- 거의 모든 세포를 감염시킬 때(일단계 증식 곡선 등): MOI 3~10.
- 풀링 라이브러리 스크리닝(세포마다 컨스트럭트 하나): 약 0.3. 세포의 약 4분의 1만 감염되지만, 그중 약 86%가 한 카피만 받습니다.
- 다단계 증식 곡선(바이러스가 배양 전체로 퍼질 때): 0.01~0.1.
계산기
MOI 계산기는 MOI에 필요한 바이러스 부피나 부피에 따른 MOI를 감염될 세포 비율 예상치와 함께 구합니다. 먼저 세포를 세려면 혈구계산판 계산기를 쓰세요.