Ce que signifie la MOI
La multiplicité d’infection (MOI) est le nombre de particules virales infectieuses ajoutées par cellule. Une MOI de 5 sur 200 000 cellules revient à ajouter 1 000 000 d’unités infectieuses.
La formule
Volume de virus (mL) = MOI × nombre de cellules ÷ titre (unités infectieuses par mL)
Pour 200 000 cellules à MOI 5 avec un titre de 1 × 108 par mL : 5 × 200 000 ÷ 108 = 0,01 mL = 10 µL.
Comptez les cellules le jour de l’infection, car elles continuent de se diviser après l’ensemencement, et utilisez un titre mesuré selon la façon dont le virus infecte (UFP pour les virus qui forment des plages, unités de transduction pour les lentivirus). Les titres physiques, comme les copies de génome ou la p24, comptent aussi les particules non infectieuses et surestiment la dose infectieuse.
Combien de cellules sont infectées
Les particules atteignent les cellules au hasard, selon la loi de Poisson. La part de cellules infectées au moins une fois vaut 1 − e−MOI :
- MOI 0,1 : environ 10 % des cellules
- MOI 1 : environ 63 %
- MOI 3 : environ 95 %
- MOI 5 : environ 99 %
Une MOI de 1 n’infecte donc pas toutes les cellules ; pour les atteindre presque toutes, il faut une MOI de 3 à 5.
Quelle MOI choisir
- Pour infecter presque toutes les cellules, par exemple pour une courbe de croissance à un cycle : MOI de 3 à 10.
- Pour les cribles de banques en pool, où chaque cellule doit porter une seule construction : environ 0,3. Seul un quart des cellules est alors infecté, mais environ 86 % d’entre elles reçoivent une seule copie.
- Pour les courbes de croissance à plusieurs cycles, où le virus se propage dans la culture : 0,01 à 0,1.
Calculateurs
Le calcul de la MOI donne le volume de virus pour une MOI, ou la MOI pour un volume, avec la part attendue de cellules infectées. Pour compter d’abord vos cellules, utilisez le calcul sur cellule de comptage.