Cara Menghitung Sel dengan Hemositometer

Menghitung

1. Campur sel dengan tripan biru, sering 1:1, yang mewarnai sel mati menjadi biru.
2. Masukkan sekitar 10 µL di bawah kaca penutup.
3. Hitung sel yang tidak berwarna di empat kotak besar di sudut. Hitung sel yang menyentuh garis atas dan kiri, tetapi tidak yang menyentuh garis bawah dan kanan, agar tidak ada yang terhitung dua kali.
4. Hitung sel biru secara terpisah bila Anda ingin tahu viabilitasnya.

Rumusnya

Setiap kotak besar berukuran 1 mm × 1 mm dengan kedalaman 0,1 mm, yaitu 0,1 µL atau 10⁻⁴ mL. Jadi:

sel per mL = rata-rata per kotak × faktor pengenceran × 10⁴

Hitungan 50, 46, 52, dan 48 rata-ratanya 49. Dengan pengenceran tripan biru 1:1 (faktor 2): 49 × 2 × 10⁴ = 9,8 × 10⁵ sel/mL.

Viabilitas adalah jumlah sel hidup dibagi seluruh sel, dikali 100.

Waktu penggandaan

Dari dua hitungan: waktu penggandaan = waktu × ln 2 ÷ ln(N₂ ÷ N₁). Sel yang tumbuh dari 1 × 10⁵ menjadi 8 × 10⁵ dalam 48 jam telah berlipat ganda tiga kali, setiap 16 jam.

Kalkulator

Kalkulator Hemositometer memberikan sel per mL, viabilitas, dan volume untuk ditanam demi jumlah sel tertentu. Kalkulator Waktu Penggandaan Sel menghitung waktu penggandaan dan laju pertumbuhan.