Rumusnya
Waktu penggandaan adalah waktu yang dibutuhkan populasi yang tumbuh untuk menjadi dua kali lipat. Dari hitungan N1 di awal dan N2 setelah waktu t:
waktu penggandaan = t × ln 2 ÷ ln(N2 ÷ N1)
ln adalah logaritma natural dan ln 2 bernilai 0,693. Rumus yang sama berlaku untuk sel yang dihitung di hemositometer, bakteri yang diukur dengan OD600, atau populasi apa pun yang tumbuh secara eksponensial.
Contoh perhitungan
Sebuah flask yang ditanami 2 × 105 sel berisi 1,6 × 106 sel 72 jam kemudian.
- N2 ÷ N1 = 1,6 × 106 ÷ 2 × 105 = 8.
- ln 8 = 2,079.
- Waktu penggandaan = 72 × 0,693 ÷ 2,079 = 24 jam.
Pengecekan cepat: 8 adalah 23, jadi sel berlipat ganda tiga kali dalam 72 jam, sekali setiap 24 jam.
Laju pertumbuhan dan waktu generasi
Konstanta laju pertumbuhan adalah k = ln(N2 ÷ N1) ÷ t, di sini 2,079 ÷ 72 = 0,0289 per jam, dan waktu penggandaan adalah ln 2 ÷ k. Ahli mikrobiologi menyebut waktu penggandaan bakteri sebagai waktu generasi; angkanya sama.
Nilai khas
- E. coli dalam medium kaya pada 37 °C: sekitar 20 menit.
- Ragi: 90 menit sampai 2 jam.
- Sel HeLa, HEK293, dan CHO: 20 sampai 24 jam.
- Sel primer dan lini yang lambat: 30 sampai 60 jam atau lebih.
Mendapatkan angka yang dapat diandalkan
Hitung hanya saat sel berada di fase log. Sel yang baru ditanam berhenti sejenak sebelum mulai membelah, dan sel yang mendekati konfluen atau berada di medium yang sudah habis melambat; keduanya memperpanjang waktu penggandaan semu. Gunakan hitungan yang berjarak setidaknya dua penggandaan, hitung dengan cara yang sama setiap kali, dan untuk sel adheren hitung hanya sel hidup yang menempel. Kepadatan penanaman dan nomor pasase mengubah hasil, jadi catat keduanya saat melaporkan.
Kalkulator
Kalkulator Waktu Penggandaan Sel memberikan waktu penggandaan, laju pertumbuhan, dan jumlah penggandaan dari dua hitungan. Hitung sel dengan Kalkulator Hemositometer, dan untuk bakteri ubah pembacaan OD600 menjadi sel per mL dengan Kalkulator OD600.