कोशिका दोहरीकरण समय कैसे निकालें

फ़ॉर्मूला

दोहरीकरण समय वह समय है जिसमें बढ़ती हुई आबादी दोगुनी हो जाती है। शुरुआत में गिनती N₁ और समय t के बाद N₂ हो तो:

दोहरीकरण समय = t × ln 2 ÷ ln(N₂ ÷ N₁)

ln प्राकृतिक लघुगणक है और ln 2 का मान 0.693 है। यही फ़ॉर्मूला हीमोसाइटोमीटर पर गिनी कोशिकाओं, OD600 से मापे बैक्टीरिया, या घातांकीय रूप से बढ़ती किसी भी आबादी पर लागू होता है।

हल किया उदाहरण

2 × 10⁵ कोशिकाओं से सीड किए फ़्लास्क में 72 घंटे बाद 1.6 × 10⁶ कोशिकाएँ हैं।

1. N₂ ÷ N₁ = 1.6 × 10⁶ ÷ 2 × 10⁵ = 8।
2. ln 8 = 2.079।
3. दोहरीकरण समय = 72 × 0.693 ÷ 2.079 = 24 घंटे।

झटपट जाँच: 8 यानी 2³, तो कोशिकाएँ 72 घंटों में तीन बार दोगुनी हुईं, हर 24 घंटे में एक बार।

वृद्धि दर और जनन समय

वृद्धि दर स्थिरांक k = ln(N₂ ÷ N₁) ÷ t है, यहाँ 2.079 ÷ 72 = 0.0289 प्रति घंटा, और दोहरीकरण समय ln 2 ÷ k है। सूक्ष्मजीव विज्ञानी बैक्टीरिया के दोहरीकरण समय को जनन समय कहते हैं; अंक वही है।

आम मान

• 37 °C पर समृद्ध मीडियम में E. coli: लगभग 20 मिनट।
• यीस्ट: 90 मिनट से 2 घंटे।
• HeLa, HEK293 और CHO कोशिकाएँ: 20 से 24 घंटे।
• प्राथमिक कोशिकाएँ और धीमी लाइनें: 30 से 60 घंटे या ज़्यादा।

भरोसेमंद अंक पाने के लिए

सिर्फ़ तभी गिनें जब कोशिकाएँ लॉग फ़ेज़ में हों। ताज़ा सीड की गई कोशिकाएँ विभाजन शुरू करने से पहले रुकती हैं, और कॉन्फ़्लुएंस के पास या पुराने मीडियम में कोशिकाएँ धीमी हो जाती हैं; दोनों से दिखने वाला दोहरीकरण समय बढ़ जाता है। कम से कम दो दोहरीकरण के अंतर वाली गिनतियाँ लें, हर बार एक ही तरीके से गिनें, और चिपकी रहने वाली कोशिकाओं में सिर्फ़ जीवित, चिपकी कोशिकाएँ गिनें। सीडिंग घनत्व और पैसेज संख्या से नतीजा बदलता है, इसलिए रिपोर्ट करते समय इन्हें भी लिखें।

कैलकुलेटर

कोशिका दोहरीकरण समय कैलकुलेटर दो गिनतियों से दोहरीकरण समय, वृद्धि दर और दोहरीकरणों की संख्या देता है। कोशिकाएँ हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटर से गिनें, और बैक्टीरिया के लिए OD600 रीडिंग को OD600 कैलकुलेटर से सेल प्रति mL में बदलें।