Zellen mit einer Zählkammer zählen

Zählen

1. Die Zellen mit Trypanblau mischen, oft 1:1. Es färbt tote Zellen blau.
2. Etwa 10 µL unter das Deckglas geben.
3. Die ungefärbten Zellen in den vier großen Eckquadraten zählen. Zellen auf der oberen und linken Linie mitzählen, auf der unteren und rechten nicht, damit keine doppelt gezählt wird.
4. Die blauen Zellen getrennt zählen, wenn man die Viabilität braucht.

Die Formel

Jedes große Quadrat misst 1 mm × 1 mm bei 0,1 mm Tiefe, das sind 0,1 µL oder 10⁻⁴ mL. Also:

Zellen pro mL = Mittelwert pro Quadrat × Verdünnungsfaktor × 10⁴

Zählungen von 50, 46, 52 und 48 ergeben im Mittel 49. Bei 1:1 mit Trypanblau (Faktor 2): 49 × 2 × 10⁴ = 9,8 × 10⁵ Zellen/mL.

Die Viabilität ist die Zahl lebender Zellen geteilt durch alle Zellen, mal 100.

Verdopplungszeit

Aus zwei Zählungen: Verdopplungszeit = Zeit × ln 2 ÷ ln(N₂ ÷ N₁). Zellen, die in 48 Stunden von 1 × 10⁵ auf 8 × 10⁵ wachsen, haben sich dreimal verdoppelt, alle 16 Stunden.

Rechner

Der Zählkammer-Rechner gibt Zellen pro mL, Viabilität und das Volumen zum Aussäen einer gewünschten Zellzahl an. Der Rechner für die Verdopplungszeit berechnet Verdopplungszeit und Wachstumsrate.