Como calcular uma IC50

O que é a IC50

A IC50 (concentração inibitória média) é a concentração de um fármaco ou inibidor que reduz uma resposta, como atividade enzimática ou viabilidade celular, até a metade entre seus níveis máximo e mínimo. Para uma resposta que sobe com a concentração, o mesmo ponto se chama EC50.

Planejando o experimento

Teste de 8 a 12 concentrações igualmente espaçadas em escala log, como passos de 3 ou de 10, para ter pontos nos dois platôs e no meio.
Inclua um controle sem tratamento (100%) e um controle de inibição total ou de fundo (0%).
Meça cada concentração em réplica.

Normalizando os dados

Converta cada leitura em porcentagem dos controles:

% resposta = (leitura − fundo) ÷ (sem tratamento − fundo) × 100

Ajustando a curva

Dados dose-resposta formam uma curva em S contra o log da concentração, ajustada com o modelo logístico de quatro parâmetros:

resposta = mínimo + (máximo − mínimo) ÷ (1 + 10^{(log IC50 − log concentração) × coeficiente de Hill})

O ajuste encontra os platôs superior e inferior, a IC50 no ponto médio e o coeficiente de Hill, que descreve a inclinação. Se seus dados não chegam a um platô, fixar o máximo em 100 e o mínimo em 0 depois de normalizar dá um ajuste mais estável.

Lendo o resultado

IC50: um valor menor indica um composto mais potente.
Coeficiente de Hill: cerca de −1 numa curva descendente simples. Inclinações muito maiores ou menores merecem uma segunda olhada.
R² e o gráfico: a curva deve passar entre os pontos sem um padrão sistemático de desvios.
Uma IC50 fora da faixa testada é uma extrapolação e deve ser confirmada com mais concentrações.

Calculadoras

A calculadora de IC50 ajusta a curva de quatro parâmetros às suas réplicas, desenha-a e dá a IC50 ou EC50, o coeficiente de Hill, os platôs e o R². Planeje as concentrações com a calculadora de diluição seriada.

Ferramentas deste guia

Calculadora de IC50 Calculadora de diluição seriada

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