Pourquoi des solutions mères
Une solution mère est une solution concentrée qu’on dilue au besoin. Peser avec précision quelques milligrammes pour chaque lot de milieu est difficile ; peser un gramme une fois pour un stock concentré est facile, et ajouter un volume fixe de stock est rapide et reproductible. Les stocks concentrés se conservent aussi plus longtemps et prennent moins de place au congélateur.
La notation ×
Un stock 1000× est mille fois plus concentré que sa concentration de travail : on le dilue au 1/1000, soit 1 µL de stock par mL de solution finale. Les stocks 10× et 100× fonctionnent de la même façon.
Un exemple : l’ampicilline
Les boîtes de LB contiennent de l’ampicilline à 100 µg/mL.
- Stock 1000× : 100 µg/mL × 1000 = 100 mg/mL.
- Pour 10 mL de stock, dissolvez 100 mg/mL × 10 mL = 1 g d’ampicilline dans l’eau et stérilisez par filtration.
- Pour 500 mL de gélose, ajoutez 500 ÷ 1000 = 0,5 mL, soit 500 µL de stock, une fois la gélose refroidie vers 50 à 55 °C.
Concentrations de travail courantes des antibiotiques
- Ampicilline et carbénicilline : 100 µg/mL (stocks dans l’eau)
- Kanamycine : 50 µg/mL (eau)
- Spectinomycine : 50 µg/mL (eau)
- Chloramphénicol : 25 µg/mL (éthanol)
- Tétracycline : 10 µg/mL (éthanol, à l’abri de la lumière)
Ce sont des valeurs courantes ; suivez votre protocole s’il diffère.
Conserver les stocks
Répartissez les stocks en aliquotes, étiquetez-les avec le nom, la concentration et la date, et gardez-les à −20 °C. Décongelez une aliquote à la fois plutôt que de recongeler sans cesse le même tube.
Calculateurs
Le calcul de solution mère donne la masse à peser et le volume à ajouter pour tout stock ×. Pour les autres dilutions, utilisez le calcul de dilution, et pour les stocks molaires le calcul de molarité.