Симулятор хроматографии
Уравнения этой модели
| R_f | фактор удерживания на пластинке | от 0 (остаётся на линии старта) до 1 (идёт с фронтом); оба расстояния отсчитываются от линии старта | |
|---|---|---|---|
| d_front | путь растворителя | растёт как квадратный корень из времени, пока растворитель пропитывает пластинку |
При текущих значениях:
| k | коэффициент удерживания: время, проведённое на пластинке или сорбенте ÷ время в растворителе | чем полярнее вещество по сравнению с растворителем, тем больше k | |
|---|---|---|---|
| p | полярность вещества | по шкале примерно от 0 до 1 (очень неполярные вещества — ниже 0), подобранной так, чтобы значения Rf совпадали с опубликованными в эталонном растворителе | |
| s | полярность растворителя | задаётся меню «Растворитель»; более полярный растворитель уносит полярные вещества дальше |
При текущих значениях:
| t_R | время удерживания пика в колонке | t₀ — время прохода самого растворителя, задаётся «Скоростью потока (мл в минуту, колонка)» | |
|---|---|---|---|
| N | Эффективность колонки N (теоретические тарелки) | лучше набитая или более длинная колонка даёт более узкие пики |
При текущих значениях:
| R_s | разрешение двух ближайших пятен или пиков | около 1,5 и больше — чистое разделение; ниже 1 они перекрываются |
|---|
При текущих значениях:
Как пользоваться симулятором хроматографии
- Выберите пластинку, смесь и растворитель. Растворитель пропитывает пластинку снизу, фронт отмечен синей линией, а каждое вещество проходит постоянную долю пути фронта, заданную тем, насколько сильно оно прилипает к полярной пластинке по сравнению с тем, как хорошо его несёт растворитель. Когда фронт доходит до верха, пластинку вынимают; в результатах перечислены расстояние и значение Rf каждого пятна.
- Попробуйте пигменты листа в гексане с ацетоном, затем в чистом гексане или этилацетате и посмотрите, как меняется разделение; аминокислоты бесцветны, пока вы не отметите проявление нингидрином. График — скан интенсивности цвета вдоль дорожки, а разрешение говорит, перекрываются ли два ближайших пятна. Отметьте «Растворитель выше линии старта», чтобы увидеть, что происходит, когда пятна опущены в растворитель.
- Переключитесь на колонку: полосы движутся вниз с разной скоростью и выходят в детектор, который рисует хроматограмму из пиков. Повысьте эффективность N для более узких пиков, меняйте скорость потока, чтобы изменить мёртвое время t₀, и сравнивайте времена удерживания и разрешение. Симулятор гель-электрофореза разделяет ДНК по размеру.
Частые вопросы
Что такое значение Rf?
Фактор удерживания на пластинке: расстояние, пройденное пятном, делённое на расстояние, пройденное фронтом растворителя, оба от линии старта, где нанесён образец. Он изменяется от 0 (вещество не движется) до 1 (движется с растворителем). Для данной пластинки, растворителя и температуры у вещества всегда примерно одно и то же Rf, по которому пятна и опознают.
Почему вещества разделяются?
Каждое вещество часть времени проводит прилипшим к неподвижной фазе (бумаге, силикагелю пластинки ТСХ или наполнителю колонки), а часть — растворённым в подвижном растворителе. Это отношение — его фактор удерживания k, и Rf = 1 ÷ (1 + k). Сильнее прилипающие вещества движутся медленнее. На полярной пластинке сильнее всего прилипают полярные вещества, поэтому более полярный растворитель уносит их дальше.
Почему линия старта должна быть выше растворителя?
Если пятна оказываются ниже поверхности растворителя в камере, они растворяются прямо в нём, а не поднимаются по пластинке. Проведите линию старта карандашом (чернила сами разделились бы) примерно в 1 см от низа, с растворителем ниже неё.
Что означает разрешение в хроматографии?
Насколько хорошо разделены два соседних пика или пятна: Rs = 2 × разность времён удерживания ÷ сумма ширин пиков. При Rs = 1 они перекрываются примерно на 2%; при 1,5 разделены до базовой линии. Его улучшают более узкие пики (выше эффективность N) или бо́льшая разница в k.
Пишет, что WebGL выключен.
Для 3D-вида нужен WebGL, который есть во всех современных браузерах. Он может быть выключен, если в настройках браузера отключено аппаратное ускорение или графический драйвер очень старый. Включите аппаратное ускорение или попробуйте другой браузер.
Загружается ли что-нибудь?
Нет. Симуляцию рисует ваш собственный браузер с помощью WebGL; ничего никуда не отправляется, и после загрузки страницы она работает и офлайн.