Simulador de cromatografia
Equações desta simulação
| R_f | fator de retenção numa placa | entre 0 (fica na linha de base) e 1 (corre com a frente); as duas distâncias são medidas a partir da linha de base | |
|---|---|---|---|
| d_front | distância percorrida pelo solvente | cresce com a raiz quadrada do tempo enquanto o solvente sobe pela placa |
Com os valores atuais:
| k | fator de retenção: tempo preso à placa ou ao recheio ÷ tempo no solvente | quanto mais polar o composto em relação ao solvente, maior o k | |
|---|---|---|---|
| p | polaridade do composto | numa escala de mais ou menos 0 a 1 (compostos muito apolares ficam abaixo de 0), escolhida para que os Rf batam com valores publicados num solvente de referência | |
| s | polaridade do solvente | definida no menu Solvente; um solvente mais polar leva os compostos polares mais longe |
Com os valores atuais:
| t_R | tempo de retenção de um pico na coluna | t₀ é o tempo que o próprio solvente leva, definido por Vazão (mL por minuto, coluna) | |
|---|---|---|---|
| N | Eficiência da coluna N (pratos teóricos) | uma coluna mais bem empacotada ou mais longa dá picos mais estreitos |
Com os valores atuais:
| R_s | resolução das duas manchas ou picos mais próximos | a partir de 1,5 a separação é limpa; abaixo de 1 eles se sobrepõem |
|---|
Com os valores atuais:
Como usar o simulador de cromatografia
- Escolha uma placa, uma mistura e um solvente. O solvente sobe pela placa a partir de baixo, com a frente marcada por uma linha azul, e cada composto percorre uma fração fixa da distância da frente, conforme o quanto ele gruda na placa polar e o quanto o solvente o arrasta. Quando a frente chega perto do topo, a placa é retirada; os resultados dão a distância e o valor Rf de cada mancha.
- Experimente os pigmentos de folha em hexano e acetona, depois em hexano puro ou em acetato de etila, e veja a separação mudar; os aminoácidos são incolores até você marcar Revelar com ninidrina. O gráfico é uma varredura da intensidade da cor ao longo da raia, e a resolução diz se as duas manchas mais próximas se sobrepõem. Marque Solvente acima da linha de base para ver o que acontece quando as manchas ficam submersas.
- Passe para a coluna: as bandas descem em velocidades diferentes e saem num detector que desenha um cromatograma de picos. Aumente a eficiência N para ter picos mais estreitos, mude a vazão para mudar o tempo morto t₀ e compare os tempos de retenção e a resolução. O Simulador de eletroforese em gel separa DNA por tamanho em vez de por polaridade.
Perguntas frequentes
O que é um valor Rf?
O fator de retenção numa placa: a distância percorrida por uma mancha dividida pela percorrida pela frente do solvente, ambas medidas a partir da linha de base onde a amostra foi aplicada. Vai de 0 (o composto não se move) a 1 (move-se com o solvente). Para uma dada placa, solvente e temperatura, um composto tem sempre mais ou menos o mesmo Rf, e é assim que as manchas são identificadas.
Por que os compostos se separam?
Cada composto passa parte do tempo grudado na fase estacionária (o papel, a sílica de uma placa ou o recheio de uma coluna) e parte dissolvido no solvente em movimento. A proporção é seu fator de retenção k, e Rf = 1 ÷ (1 + k). Os compostos que grudam mais avançam mais devagar. Numa placa polar, os compostos polares grudam mais, então um solvente mais polar os leva mais longe.
Por que a linha de base deve ficar acima do solvente?
Se as manchas ficam abaixo da superfície do solvente na cuba, elas se dissolvem direto nele em vez de subir pela placa. Trace a linha de base a lápis (a tinta de caneta também se separaria) a cerca de 1 cm da borda de baixo, com o solvente abaixo dela.
O que significa resolução em cromatografia?
O quanto dois picos ou manchas vizinhos estão separados: Rs = 2 × a diferença dos tempos de retenção ÷ a soma das larguras dos picos. Com Rs = 1 eles se sobrepõem cerca de 2 %; com 1,5 estão separados até a linha de base. Picos mais estreitos (mais eficiência N) ou uma diferença maior de k a melhoram.
Diz que o WebGL está desativado.
A visualização 3D precisa de WebGL, que todo navegador atual tem. Ele pode ser desativado pela aceleração de hardware desligada nas configurações do navegador, ou por um driver gráfico muito antigo. Ligue a aceleração de hardware ou tente outro navegador.
Alguma coisa é enviada?
Não. A simulação é desenhada pelo seu próprio navegador com WebGL; nada é enviado a lugar nenhum, e ela continua funcionando offline depois que a página carrega.