Simulateur de chromatographie
Équations de cette simulation
| R_f | rapport frontal sur une plaque | entre 0 (reste sur la ligne de dépôt) et 1 (avance avec le front) ; les deux distances se mesurent depuis la ligne de dépôt | |
|---|---|---|---|
| d_front | distance parcourue par le solvant | croît comme la racine carrée du temps pendant que le solvant monte dans la plaque |
Avec les valeurs actuelles :
| k | facteur de rétention : temps fixé sur la plaque ou le garnissage ÷ temps dans le solvant | plus le composé est polaire par rapport au solvant, plus k est grand | |
|---|---|---|---|
| p | polarité du composé | sur une échelle allant à peu près de 0 à 1 (les composés très apolaires passent sous 0), choisie pour que les Rf correspondent à des valeurs publiées dans un solvant de référence | |
| s | polarité du solvant | réglée dans le menu Solvant ; un solvant plus polaire entraîne plus loin les composés polaires |
Avec les valeurs actuelles :
| t_R | temps de rétention d'un pic dans la colonne | t₀ est le temps que met le solvant lui-même, réglé par Débit (mL par minute, colonne) | |
|---|---|---|---|
| N | Efficacité de la colonne N (plateaux théoriques) | une colonne mieux remplie ou plus longue donne des pics plus étroits |
Avec les valeurs actuelles :
| R_s | résolution des deux taches ou pics les plus proches | à partir d'environ 1,5 la séparation est nette ; en dessous de 1 ils se chevauchent |
|---|
Avec les valeurs actuelles :
Comment utiliser le simulateur de chromatographie
- Choisissez une plaque, un mélange et un solvant. Le solvant monte dans la plaque depuis le bas, son front marqué par une ligne bleue, et chaque composé parcourt une fraction fixe de la distance du front, selon qu’il s’accroche à la plaque polaire ou que le solvant l’entraîne. Quand le front arrive près du haut, la plaque est retirée ; les résultats donnent la distance et la valeur Rf de chaque tache.
- Essayez les pigments de feuille dans l’hexane et l’acétone, puis dans l’hexane pur ou l’acétate d’éthyle, et regardez la séparation changer ; les acides aminés sont incolores jusqu’à ce que vous cochiez Révéler à la ninhydrine. Le graphique est un balayage de l’intensité de la couleur le long de la piste, et la résolution indique si les deux taches les plus proches se chevauchent. Cochez Solvant au-dessus de la ligne de dépôt pour voir ce qui arrive quand les taches sont immergées.
- Passez à la colonne : les bandes descendent à des vitesses différentes et sortent vers un détecteur qui trace un chromatogramme de pics. Augmentez l’efficacité N pour des pics plus fins, changez le débit pour changer le temps mort t₀, et comparez les temps de rétention et la résolution. Le Simulateur d'électrophorèse sur gel sépare l’ADN par taille plutôt que par polarité.
Questions fréquentes
Qu’est-ce qu’une valeur Rf ?
Le rapport frontal sur une plaque : la distance parcourue par une tache divisée par celle parcourue par le front du solvant, toutes deux mesurées depuis la ligne de dépôt où l’échantillon a été posé. Elle va de 0 (le composé ne bouge pas) à 1 (il avance avec le solvant). Pour une plaque, un solvant et une température donnés, un composé a toujours à peu près le même Rf, et c’est ainsi qu’on identifie les taches.
Pourquoi les composés se séparent-ils ?
Chaque composé passe une partie du temps fixé sur la phase stationnaire (le papier, la silice d’une plaque ou le remplissage d’une colonne) et une partie dissous dans le solvant qui avance. Le rapport est son facteur de rétention k, et Rf = 1 ÷ (1 + k). Les composés qui s’accrochent davantage avancent plus lentement. Sur une plaque polaire, les composés polaires s’accrochent davantage, donc un solvant plus polaire les emmène plus loin.
Pourquoi la ligne de dépôt doit-elle être au-dessus du solvant ?
Si les taches sont sous la surface du solvant dans la cuve, elles s’y dissolvent directement au lieu de monter dans la plaque. Tracez la ligne de dépôt au crayon (l’encre d’un stylo se séparerait aussi) à environ 1 cm du bord inférieur, avec le solvant en dessous.
Que signifie la résolution en chromatographie ?
La qualité de la séparation de deux pics ou taches voisins : Rs = 2 × l’écart des temps de rétention ÷ la somme des largeurs des pics. À Rs = 1 ils se chevauchent d’environ 2 % ; à 1,5 ils sont séparés jusqu’à la ligne de base. Des pics plus fins (une efficacité N plus grande) ou un plus grand écart de k l’améliorent.
Il est indiqué que WebGL est désactivé.
La vue 3D a besoin de WebGL, présent dans tous les navigateurs actuels. Il peut être désactivé si l'accélération matérielle est coupée dans les réglages du navigateur, ou à cause d'un pilote graphique très ancien. Activez l'accélération matérielle ou essayez un autre navigateur.
Quelque chose est-il envoyé ?
Non. La simulation est dessinée par votre propre navigateur avec WebGL ; rien n'est envoyé nulle part, et elle continue de fonctionner hors ligne une fois la page chargée.