Simulador de cromatografía
Ecuaciones de esta simulación
| R_f | factor de retención en una placa | entre 0 (se queda en la línea de base) y 1 (avanza con el frente); las dos distancias se miden desde la línea de base | |
|---|---|---|---|
| d_front | distancia recorrida por el disolvente | crece como la raíz cuadrada del tiempo mientras el disolvente sube por la placa |
Con los valores actuales:
| k | factor de retención: tiempo pegado a la placa o al relleno ÷ tiempo en el disolvente | cuanto más polar es el compuesto frente al disolvente, mayor es k | |
|---|---|---|---|
| p | polaridad del compuesto | en una escala aproximada de 0 a 1 (los compuestos muy apolares quedan por debajo de 0), elegida para que los Rf coincidan con valores publicados en un disolvente de referencia | |
| s | polaridad del disolvente | se elige en el menú Disolvente; un disolvente más polar lleva más lejos los compuestos polares |
Con los valores actuales:
| t_R | tiempo de retención de un pico en la columna | t₀ es el tiempo que tarda el propio disolvente, fijado por Caudal (mL por minuto, columna) | |
|---|---|---|---|
| N | Eficiencia de la columna N (platos teóricos) | una columna mejor empaquetada o más larga da picos más estrechos |
Con los valores actuales:
| R_s | resolución de las dos manchas o picos más cercanos | a partir de 1,5 la separación es limpia; por debajo de 1 se solapan |
|---|
Con los valores actuales:
Cómo usar el simulador de cromatografía
- Elige una placa, una mezcla y un disolvente. El disolvente sube por la placa desde abajo, con el frente marcado por una línea azul, y cada compuesto recorre una fracción fija de la distancia del frente, según lo que se pega a la placa polar frente a lo bien que lo arrastra el disolvente. Cuando el frente llega arriba se retira la placa; los resultados dan la distancia y el valor Rf de cada mancha.
- Prueba los pigmentos de hoja en hexano y acetona, luego en hexano puro o en acetato de etilo, y mira cómo cambia la separación; los aminoácidos son incoloros hasta que marcas Revelar con ninhidrina. La gráfica es un barrido de la intensidad del color a lo largo del carril, y la resolución te dice si las dos manchas más cercanas se solapan. Marca Disolvente por encima de la línea de base para ver qué pasa cuando las manchas quedan sumergidas.
- Cambia a la columna: las bandas bajan a distintas velocidades y salen hacia un detector que dibuja un cromatograma de picos. Sube la eficiencia N para tener picos más estrechos, cambia el caudal para cambiar el tiempo muerto t₀, y compara los tiempos de retención y la resolución. El Simulador de electroforesis en gel separa el ADN por tamaño en lugar de por polaridad.
Preguntas frecuentes
¿Qué es un valor Rf?
El factor de retención en una placa: la distancia recorrida por una mancha dividida por la recorrida por el frente del disolvente, las dos medidas desde la línea de base donde se puso la muestra. Va de 0 (el compuesto no se mueve) a 1 (se mueve con el disolvente). Para una placa, un disolvente y una temperatura dados, un compuesto tiene siempre más o menos el mismo Rf, y así se identifican las manchas.
¿Por qué se separan los compuestos?
Cada compuesto pasa parte del tiempo pegado a la fase estacionaria (el papel, la sílice de una placa o el relleno de una columna) y parte disuelto en el disolvente que avanza. La proporción es su factor de retención k, y Rf = 1 ÷ (1 + k). Los compuestos que se pegan más avanzan más despacio. En una placa polar los compuestos polares se pegan más, así que un disolvente más polar los lleva más lejos.
¿Por qué la línea de base debe quedar por encima del disolvente?
Si las manchas quedan bajo la superficie del disolvente de la cubeta, se disuelven directamente en él en vez de subir por la placa. Traza la línea de base a lápiz (la tinta se separaría también) a cerca de 1 cm del borde inferior, con el disolvente por debajo.
¿Qué significa resolución en cromatografía?
Lo bien separados que están dos picos o manchas vecinos: Rs = 2 × la diferencia de tiempos de retención ÷ la suma de las anchuras de los picos. Con Rs = 1 se solapan cerca de un 2 %; con 1,5 están separados hasta la línea de base. Picos más estrechos (más eficiencia N) o una mayor diferencia de k la mejoran.
Dice que WebGL está desactivado.
La vista 3D necesita WebGL, que tienen todos los navegadores actuales. Puede estar desactivado si la aceleración por hardware está apagada en los ajustes del navegador, o por un controlador gráfico muy antiguo. Activa la aceleración por hardware o prueba otro navegador.
¿Se sube algo?
No. La simulación la dibuja tu propio navegador con WebGL; no se envía nada a ningún sitio y sigue funcionando sin conexión una vez cargada la página.