Simulator Kromatografi
Persamaan dalam simulasi ini
| R_f | faktor retensi pada pelat | antara 0 (tetap di garis awal) dan 1 (bergerak bersama garis depan); kedua jarak diukur dari garis awal | |
|---|---|---|---|
| d_front | jarak tempuh pelarut | bertambah sebanding akar waktu saat pelarut merambat naik di pelat |
Dengan nilai saat ini:
| k | faktor retensi: waktu menempel di pelat atau isian ÷ waktu di pelarut | makin polar senyawa dibanding pelarut, makin besar k | |
|---|---|---|---|
| p | kepolaran senyawa | pada skala kira-kira 0 sampai 1 (senyawa yang sangat nonpolar di bawah 0), dipilih agar nilai Rf cocok dengan nilai terbitan dalam pelarut acuan | |
| s | kepolaran pelarut | diatur di menu Pelarut; pelarut yang lebih polar membawa senyawa polar lebih jauh |
Dengan nilai saat ini:
| t_R | waktu retensi sebuah puncak di kolom | t₀ adalah waktu yang dibutuhkan pelarut itu sendiri, diatur oleh Laju alir (mL per menit, kolom) | |
|---|---|---|---|
| N | Efisiensi kolom N (pelat teoretis) | kolom yang lebih rapat atau lebih panjang memberi puncak lebih sempit |
Dengan nilai saat ini:
| R_s | resolusi dua totolan atau puncak terdekat | sekitar 1,5 ke atas pemisahannya bersih; di bawah 1 saling tumpang tindih |
|---|
Dengan nilai saat ini:
Cara memakai simulator kromatografi
- Pilih pelat, campuran, dan pelarut. Pelarut merambat naik dari bawah pelat, garis depannya ditandai garis biru, dan setiap senyawa menempuh bagian tetap dari jarak garis depan, tergantung seberapa kuat ia menempel pada pelat yang polar dibanding seberapa baik pelarut membawanya. Saat garis depan mendekati puncak pelat, pelat diangkat; hasilnya memberi jarak dan nilai Rf setiap noda.
- Coba pigmen daun dalam heksana dan aseton, lalu dalam heksana murni atau etil asetat, dan lihat pemisahannya berubah; asam amino tidak berwarna sampai kamu mencentang Warnai dengan ninhidrin. Grafik adalah pindaian intensitas warna di sepanjang lajur, dan resolusi memberi tahu apakah dua noda terdekat saling tumpang tindih. Centang Pelarut di atas garis awal untuk melihat apa yang terjadi bila noda terendam.
- Pindah ke kolom: pita-pita turun dengan kecepatan berbeda dan keluar ke detektor yang menggambar kromatogram berupa puncak-puncak. Naikkan efisiensi N agar puncak lebih sempit, ubah laju alir untuk mengubah waktu mati t₀, lalu bandingkan waktu retensi dan resolusinya. Simulator Elektroforesis Gel memisahkan DNA menurut ukuran, bukan polaritas.
Pertanyaan umum
Apa itu nilai Rf?
Faktor retensi pada pelat: jarak tempuh noda dibagi jarak tempuh garis depan pelarut, keduanya diukur dari garis awal tempat sampel ditotolkan. Nilainya dari 0 (senyawa tidak bergerak) sampai 1 (bergerak bersama pelarut). Untuk pelat, pelarut, dan suhu tertentu, sebuah senyawa selalu punya Rf yang kurang lebih sama, dan dengan cara itulah noda dikenali.
Mengapa senyawa-senyawa terpisah?
Setiap senyawa menghabiskan sebagian waktunya menempel pada fase diam (kertas, silika pada pelat, atau isian kolom) dan sebagian lagi terlarut dalam pelarut yang bergerak. Perbandingannya adalah faktor retensi k, dan Rf = 1 ÷ (1 + k). Senyawa yang lebih kuat menempel bergerak lebih lambat. Pada pelat polar, senyawa polar lebih kuat menempel, jadi pelarut yang lebih polar membawanya lebih jauh.
Mengapa garis awal harus di atas pelarut?
Jika noda berada di bawah permukaan pelarut di dalam bejana, noda langsung larut ke pelarut alih-alih merambat naik di pelat. Gambar garis awal dengan pensil (tinta pulpen juga akan ikut terpisah) sekitar 1 cm dari tepi bawah, dengan pelarut di bawahnya.
Apa arti resolusi dalam kromatografi?
Seberapa baik dua puncak atau noda yang bersebelahan terpisah: Rs = 2 × selisih waktu retensi ÷ jumlah lebar puncak. Pada Rs = 1 keduanya tumpang tindih sekitar 2%; pada 1,5 keduanya terpisah sampai garis dasar. Puncak yang lebih sempit (efisiensi N lebih tinggi) atau selisih k yang lebih besar memperbaikinya.
Katanya WebGL dimatikan.
Tampilan 3D memerlukan WebGL, yang dimiliki semua browser terkini. WebGL bisa nonaktif jika akselerasi perangkat keras dimatikan di pengaturan browser, atau karena driver grafis yang sangat lama. Nyalakan akselerasi perangkat keras, atau coba browser lain.
Apakah ada yang diunggah?
Tidak. Simulasi digambar oleh browser Anda sendiri dengan WebGL; tidak ada yang dikirim ke mana pun, dan simulasi tetap berjalan offline setelah halaman dimuat.