Что такое IC50
IC50 (концентрация полумаксимального ингибирования) — концентрация препарата или ингибитора, при которой отклик, например активность фермента или жизнеспособность клеток, снижается до середины между верхним и нижним уровнями. Для отклика, растущего с концентрацией, та же точка называется EC50.
Планирование эксперимента
- Проверьте 8–12 концентраций, равномерно расположенных в логарифмической шкале, например с трёх- или десятикратным шагом, чтобы на кривой были точки на обоих плато и в середине.
- Включите необработанный контроль (100%) и контроль полного ингибирования или фона (0%).
- Ставьте каждую концентрацию в повторностях.
Нормирование данных
Переведите каждое показание в проценты от контролей:
% отклика = (показание − фон) ÷ (необработанный − фон) × 100
Подбор кривой
Данные доза — эффект образуют S-образную кривую в зависимости от логарифма концентрации, которую подбирают четырёхпараметрической логистической моделью:
отклик = низ + (верх − низ) ÷ (1 + 10(log IC50 − log концентрации) × коэффициент Хилла)
Подбор находит верхнее и нижнее плато, IC50 в середине и коэффициент Хилла, описывающий крутизну. Если данные не выходят на плато, фиксация верха на 100 и низа на 0 после нормирования даёт более устойчивый подбор.
Как читать результат
- IC50: меньшее значение означает более активное соединение.
- Коэффициент Хилла: около −1 для простой нисходящей кривой. На намного более крутые или пологие наклоны стоит взглянуть ещё раз.
- R² и график: кривая должна проходить через точки без систематических промахов.
- IC50 вне проверенного диапазона — экстраполяция, и её нужно подтвердить дополнительными концентрациями.
Калькуляторы
Калькулятор IC50 подбирает четырёхпараметрическую кривую по вашим повторностям, рисует её и даёт IC50 или EC50, коэффициент Хилла, плато и R². Спланируйте концентрации в Калькулятор серийных разведений.