কোষের দ্বিগুণ হওয়ার সময় কীভাবে বের করবেন

সূত্রটি

দ্বিগুণ হওয়ার সময় হলো একটি বাড়তে থাকা জনগোষ্ঠীর দ্বিগুণ হতে লাগা সময়। শুরুতে একটি গোনা N₁ আর t সময় পরে N₂ থেকে:

দ্বিগুণ হওয়ার সময় = t × ln 2 ÷ ln(N₂ ÷ N₁)

ln হলো স্বাভাবিক লগারিদম আর ln 2 হলো 0.693। একই সূত্র খাটে একটি হিমোসাইটোমিটারে গোনা কোষে, OD600 দিয়ে মাপা ব্যাকটেরিয়ায়, কিংবা সূচকীয়ভাবে বাড়তে থাকা যেকোনো জনগোষ্ঠীতেই।

একটি কষে দেখানো উদাহরণ

2 × 10⁵ কোষ দিয়ে বসানো একটি ফ্লাস্কে 72 ঘণ্টা পরে 1.6 × 10⁶ কোষ আছে।

1. N₂ ÷ N₁ = 1.6 × 10⁶ ÷ 2 × 10⁵ = 8।
2. ln 8 = 2.079।
3. দ্বিগুণ হওয়ার সময় = 72 × 0.693 ÷ 2.079 = 24 ঘণ্টা।

একটি দ্রুত পরখ: 8 হলো 2³, তাই কোষগুলো 72 ঘণ্টায় তিনবার দ্বিগুণ হয়েছে, প্রতি 24 ঘণ্টায় একবার।

বাড়ার হার আর প্রজন্মের সময়

বাড়ার হারের ধ্রুবক হলো k = ln(N₂ ÷ N₁) ÷ t, এখানে 2.079 ÷ 72 = প্রতি ঘণ্টায় 0.0289, আর দ্বিগুণ হওয়ার সময় হলো ln 2 ÷ k। অণুজীববিজ্ঞানীরা ব্যাকটেরিয়ার দ্বিগুণ হওয়ার সময়কে প্রজন্মের সময় বলেন; তা একই সংখ্যা।

চলতি মান

• 37 °C-এ ভরা মাধ্যমে E. coli: প্রায় 20 মিনিট।
• ইস্ট: 90 মিনিট থেকে 2 ঘণ্টা।
• HeLa, HEK293 আর CHO কোষ: 20 থেকে 24 ঘণ্টা।
• প্রাথমিক কোষ আর ধীর সারি: 30 থেকে 60 ঘণ্টা বা তার বেশি।

একটি ভরসার যোগ্য সংখ্যা পাওয়া

কোষ লগ দশায় থাকতেই গুনুন। সদ্য বসানো কোষ ভাগ হওয়া শুরুর আগে থেমে থাকে, আর পুরো ঢাকার কাছে কিংবা খরচ হয়ে যাওয়া মাধ্যমে কোষ ধীর হয়ে যায়, আর এই দুটিই দেখতে-পাওয়া দ্বিগুণ হওয়ার সময় টেনে লম্বা করে। অন্তত দুটি দ্বিগুণ হওয়া পেরিয়ে গোনা নিন, প্রতিবার একইভাবে গুনুন, আর সেঁটে বসা কোষে কেবল জীবিত, সেঁটে থাকা কোষই গুনুন। বসানোর ঘনত্ব আর পাসের নম্বর ফলটি বদলে দেয়, তাই তা জানানোর সময় সেগুলোও টুকে রাখুন।

হিসাব

কোষের দ্বিগুণ হওয়ার সময়ের হিসাব দুটি গোনা থেকে দ্বিগুণ হওয়ার সময়, বাড়ার হার আর দ্বিগুণ হওয়ার সংখ্যা দেয়। হিমোসাইটোমিটারের হিসাব দিয়ে কোষ গুনুন, আর ব্যাকটেরিয়ায় OD600-র হিসাব দিয়ে OD600-র পাঠকে প্রতি mL-এ কোষে বদলে নিন।