Spectroscopie : guide d’étude

Idées clés

La spectroscopie d’absorption mesure la quantité de lumière absorbée par un échantillon. La loi de Beer–Lambert rend l’absorbance proportionnelle à la concentration, ce qui est la base de la plupart des dosages colorimétriques et UV.

• La transmittance est T = I ÷ I₀ et l’absorbance A = −log₁₀ T. Une absorbance de 1 signifie que 10 % de la lumière passe, et 2 que 1 % passe.
• La loi de Beer–Lambert est A = εbc, où ε est le coefficient d’absorption molaire, b la longueur du trajet en cm et c la concentration en mol/L.
• Une courbe d’étalonnage de l’absorbance en fonction de concentrations connues permet de lire une inconnue. Elle fonctionne le mieux en dessous d’une absorbance d’environ 1.
• Faites toujours le blanc avec le solvant ou le tampon pour ne mesurer que l’absorbance de l’échantillon.

Équations clés

• A = εbc
• A = −log₁₀ T
• T = I ÷ I₀
• E = hc ÷ λ

Exemple résolu

Une solution a ε = 6220 L/(mol·cm), une cuve de 1,00 cm et A = 0,62. Alors c = A ÷ (εb) = 0,62 ÷ 6220 = 1,0 × 10⁻⁴ mol/L. La transmittance est T = 10^(−0,62) = 0,24, donc 24 % de la lumière est transmise.

Erreurs fréquentes

• Utiliser le pourcentage de transmittance à la place de l’absorbance dans A = εbc.
• Oublier la longueur du trajet quand la cuve ne fait pas 1 cm.
• Se fier à des lectures au-dessus d’une absorbance d’environ 2, où l’instrument n’est plus linéaire.

Pratique

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