Ideas clave
La espectroscopía de absorción mide cuánta luz absorbe una muestra. La ley de Beer–Lambert hace que la absorbancia sea proporcional a la concentración, que es la base de la mayoría de los ensayos colorimétricos y UV.
- La transmitancia es T = I ÷ I₀ y la absorbancia es A = −log₁₀ T. Una absorbancia de 1 significa que pasa el 10 % de la luz, y 2 que pasa el 1 %.
- La ley de Beer–Lambert es A = εbc, donde ε es la absortividad molar, b la longitud del camino en cm y c la concentración en mol/L.
- Una curva de calibración de absorbancia frente a concentraciones conocidas permite leer una incógnita. Funciona mejor por debajo de una absorbancia de aproximadamente 1.
- Haz siempre el blanco con el disolvente o tampón para medir solo la absorbancia de la muestra.
Ecuaciones clave
A = εbcA = −log₁₀ TT = I ÷ I₀E = hc ÷ λ
Ejemplo resuelto
Una disolución tiene ε = 6220 L/(mol·cm), cubeta de 1,00 cm y A = 0,62. Entonces c = A ÷ (εb) = 0,62 ÷ 6220 = 1,0 × 10⁻⁴ mol/L. La transmitancia es T = 10^(−0,62) = 0,24, es decir, se transmite el 24 % de la luz.
Errores comunes
- Usar el porcentaje de transmitancia en lugar de la absorbancia en A = εbc.
- Olvidar la longitud del camino cuando la cubeta no es de 1 cm.
- Fiarse de lecturas por encima de una absorbancia de aproximadamente 2, donde el instrumento ya no es lineal.
Práctica
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