Ideias principais
A espectroscopia de absorção mede quanta luz uma amostra absorve. A lei de Beer–Lambert faz a absorbância ser proporcional à concentração, que é a base da maioria dos ensaios colorimétricos e de UV.
- A transmitância é T = I ÷ I₀ e a absorbância é A = −log₁₀ T. Absorbância 1 significa que passa 10 % da luz, e 2 que passa 1 %.
- A lei de Beer–Lambert é A = εbc, em que ε é a absortividade molar, b o caminho óptico em cm e c a concentração em mol/L.
- Uma curva de calibração de absorbância contra concentrações conhecidas permite ler uma incógnita. Funciona melhor abaixo de absorbância de cerca de 1.
- Faça sempre o branco com o solvente ou tampão para medir apenas a absorbância da amostra.
Equações principais
A = εbcA = −log₁₀ TT = I ÷ I₀E = hc ÷ λ
Exemplo resolvido
Uma solução tem ε = 6220 L/(mol·cm), cubeta de 1,00 cm e A = 0,62. Então c = A ÷ (εb) = 0,62 ÷ 6220 = 1,0 × 10⁻⁴ mol/L. A transmitância é T = 10^(−0,62) = 0,24, ou seja, 24 % da luz é transmitida.
Erros comuns
- Usar a porcentagem de transmitância no lugar da absorbância em A = εbc.
- Esquecer o caminho óptico quando a cubeta não é de 1 cm.
- Confiar em leituras acima de absorbância de cerca de 2, onde o instrumento deixa de ser linear.
Prática
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