La fórmula
El factor de dilución es cuántas veces se ha diluido la muestra:
factor de dilución = volumen total ÷ volumen de muestra = concentración inicial ÷ concentración final
10 µL de muestra llevados a 100 µL con tampón son 100 ÷ 10 = un factor de dilución de 10. Diluir una solución madre de 5 mg/mL a 0,5 mg/mL también es un factor de 10.
Qué significa 1:10
Escrito como razón, 1:10 suele significar 1 parte de muestra en 10 partes totales (factor 10), pero algunas personas lo leen como 1 parte de muestra más 10 de diluyente (factor 11). La diferencia es del 10 %. Los protocolos que dicen «1 en 10» o «10 veces» no son ambiguos; cuando escribas uno, indica los volúmenes.
Las diluciones seriadas se multiplican
En una dilución seriada cada paso se hace a partir del tubo anterior y los factores se multiplican. Tres pasos 1:10 dan 10 × 10 × 10 = 1.000, escrito 10−3. Dos pasos 1:2 y uno 1:5 dan 2 × 2 × 5 = 20. Así se hace con precisión una dilución 1:1.000.000 sin pipetear un microlitro en un litro.
Volver al original
Multiplica lo medido por el factor de dilución total. Una placa del tubo 10−4 con 120 colonias a partir de 100 µL significa 120 ÷ 0,1 mL × 10.000 = 1,2 × 107 ufc/mL en el cultivo original. En un hemocitómetro, las células mezcladas 1:1 con azul de tripano tienen un factor de 2, y una muestra diluida 1:5 antes tiene un factor total de 10.
Hallar los volúmenes para un factor dado
Para un factor F en un volumen final V, usa V ÷ F de muestra y el resto de diluyente. Una dilución 1:40 en 200 µL son 5 µL de muestra y 195 µL de tampón. Los factores por encima de unos 20 en un solo paso obligan a pipetear volúmenes diminutos, así que divídelos en dos pasos.
Calculadoras
La Calculadora de diluciones resuelve C1V1 = C2V2 para cualquiera de los cuatro valores. La Calculadora de diluciones seriadas planifica los tubos y volúmenes de una serie, y la Calculadora de hemocitómetro aplica el factor de dilución a un recuento de células.