फ़ॉर्मूला
डाइल्यूशन फ़ैक्टर बताता है कि नमूना कितने गुना पतला हो गया:
डाइल्यूशन फ़ैक्टर = कुल आयतन ÷ नमूने का आयतन = प्रारंभिक सांद्रता ÷ अंतिम सांद्रता
10 µL नमूने को बफ़र से 100 µL तक ले जाना 100 ÷ 10 = 10 का डाइल्यूशन फ़ैक्टर है। 5 mg/mL स्टॉक को 0.5 mg/mL तक पतला करना भी 10 का फ़ैक्टर है।
1:10 का मतलब
अनुपात में लिखा 1:10 आमतौर पर कुल 10 भागों में 1 भाग नमूना (फ़ैक्टर 10) होता है, पर कुछ लोग इसे 1 भाग नमूना और 10 भाग तनुकारक (फ़ैक्टर 11) पढ़ते हैं। दोनों में 10% का फ़र्क है। "1 में 10" या "10 गुना" कहने वाले प्रोटोकॉल अस्पष्ट नहीं हैं; जब आप लिखें, आयतन दें।
क्रमिक तनुकरण गुणा होते हैं
क्रमिक तनुकरण में हर चरण पिछली ट्यूब से बनता है, और फ़ैक्टर गुणा होते हैं। तीन 1:10 चरण 10 × 10 × 10 = 1,000 देते हैं, जिसे 10−3 लिखते हैं। दो 1:2 चरण और एक 1:5 चरण 2 × 2 × 5 = 20 देते हैं। इसी तरह एक माइक्रोलीटर को एक लीटर में पिपेट किए बिना 1:1,000,000 तनुकरण सटीक बनाया जाता है।
मूल तक वापस
मापे मान को कुल डाइल्यूशन फ़ैक्टर से गुणा करें। 10−4 ट्यूब से 100 µL की प्लेट पर 120 कॉलोनियाँ यानी 120 ÷ 0.1 mL × 10,000 = मूल कल्चर में 1.2 × 107 cfu/mL। हीमोसाइटोमीटर पर ट्रिपैन ब्लू के साथ 1:1 मिली कोशिकाओं का फ़ैक्टर 2 है, और उससे पहले 1:5 पतला किया नमूना कुल फ़ैक्टर 10 रखता है।
लक्षित फ़ैक्टर के लिए आयतन
अंतिम आयतन V में फ़ैक्टर F के लिए V ÷ F नमूना लें और बाकी तनुकारक। 200 µL में 1:40 तनुकरण यानी 5 µL नमूना और 195 µL बफ़र। एक चरण में लगभग 20 से ऊपर के फ़ैक्टर में बहुत छोटे आयतन पिपेट करने पड़ते हैं, इसलिए उन्हें दो चरणों में बाँटें।
कैलकुलेटर
तनुकरण कैलकुलेटर C1V1 = C2V2 के चारों मानों में से कोई भी निकालता है। क्रमिक तनुकरण कैलकुलेटर शृंखला की ट्यूबें और आयतन तय करता है, और हीमोसाइटोमीटर कैलकुलेटर कोशिका गिनती पर डाइल्यूशन फ़ैक्टर लागू करता है।