Die Formel
Der Verdünnungsfaktor gibt an, wie viel verdünnter die Probe geworden ist:
Verdünnungsfaktor = Gesamtvolumen ÷ Probenvolumen = Ausgangskonzentration ÷ Endkonzentration
10 µL Probe, mit Puffer auf 100 µL aufgefüllt, sind 100 ÷ 10 = ein Verdünnungsfaktor von 10. Eine 5 mg/mL-Stammlösung auf 0,5 mg/mL zu verdünnen ist ebenfalls ein Faktor 10.
Was 1:10 bedeutet
Als Verhältnis geschrieben bedeutet 1:10 meist 1 Teil Probe in 10 Teilen gesamt (Faktor 10), manche lesen es aber als 1 Teil Probe plus 10 Teile Verdünnungsmittel (Faktor 11). Die beiden unterscheiden sich um 10 %. Protokolle mit „1 in 10“ oder „10-fach“ sind eindeutig; wenn du eines schreibst, gib die Volumina an.
Verdünnungsreihen multiplizieren sich
In einer Verdünnungsreihe wird jeder Schritt aus dem vorherigen Röhrchen gemacht, und die Faktoren multiplizieren sich. Drei 1:10-Schritte ergeben 10 × 10 × 10 = 1.000, geschrieben 10−3. Zwei 1:2-Schritte und ein 1:5-Schritt ergeben 2 × 2 × 5 = 20. So wird eine 1:1.000.000-Verdünnung genau hergestellt, ohne einen Mikroliter in einen Liter zu pipettieren.
Zurück zum Ausgangswert
Den Messwert mit dem Gesamtverdünnungsfaktor multiplizieren. Eine Platte aus dem 10−4-Röhrchen mit 120 Kolonien aus 100 µL bedeutet 120 ÷ 0,1 mL × 10.000 = 1,2 × 107 cfu/mL in der Ausgangskultur. In der Zählkammer haben 1:1 mit Trypanblau gemischte Zellen den Faktor 2, und eine davor 1:5 verdünnte Probe hat den Gesamtfaktor 10.
Die Volumina für einen Zielfaktor
Für einen Faktor F in einem Endvolumen V nimmt man V ÷ F Probe und den Rest Verdünnungsmittel. Eine 1:40-Verdünnung in 200 µL sind 5 µL Probe und 195 µL Puffer. Faktoren über etwa 20 in einem Schritt bedeuten winzige Pipettiervolumina, also in zwei Schritte aufteilen.
Rechner
Der Verdünnungsrechner löst C1V1 = C2V2 nach jedem der vier Werte auf. Der Rechner für Verdünnungsreihen plant Röhrchen und Volumina einer Reihe, und der Zählkammer-Rechner wendet den Verdünnungsfaktor auf eine Zellzählung an.