공식
희석 배수는 시료가 몇 배 묽어졌는지를 나타냅니다:
희석 배수 = 전체 부피 ÷ 시료 부피 = 처음 농도 ÷ 최종 농도
시료 10 µL를 완충액으로 100 µL까지 채우면 100 ÷ 10 = 희석 배수 10입니다. 5 mg/mL 스톡을 0.5 mg/mL로 희석하는 것도 10배입니다.
1:10의 뜻
비로 쓴 1:10은 보통 전체 10 중 시료 1(배수 10)을 뜻하지만, 시료 1에 희석액 10을 더한다(배수 11)고 읽는 사람도 있습니다. 둘은 10% 차이가 납니다. "10배 희석"이나 "1 in 10"이라고 쓴 프로토콜은 모호하지 않으니, 직접 쓸 때는 부피를 적으세요.
연속 희석은 곱해진다
연속 희석에서는 각 단계를 앞 튜브에서 만들므로 배수가 곱해집니다. 1:10을 세 번 하면 10 × 10 × 10 = 1,000, 즉 10−3입니다. 1:2를 두 번, 1:5를 한 번 하면 2 × 2 × 5 = 20입니다. 1 µL를 1 L에 넣는 무리한 피펫팅 없이 1:1,000,000 희석을 정확히 만드는 방법이 이것입니다.
원래 값으로 되돌리기
측정한 값에 총 희석 배수를 곱합니다. 10−4 튜브에서 100 µL를 도말한 플레이트에 콜로니가 120개면, 120 ÷ 0.1 mL × 10,000 = 원래 배양액 기준 1.2 × 107 cfu/mL입니다. 혈구계산판에서 트리판 블루와 1:1로 섞은 세포는 배수 2이고, 그 전에 1:5로 희석한 시료라면 총 배수는 10입니다.
목표 배수에 맞는 부피 구하기
최종 부피 V에서 배수 F를 만들려면 시료 V ÷ F를 취하고 나머지를 희석액으로 채웁니다. 200 µL에서 1:40 희석은 시료 5 µL와 완충액 195 µL입니다. 한 단계에 약 20배를 넘는 배수는 아주 적은 부피를 피펫팅해야 하므로 두 단계로 나눕니다.
계산 도구
희석 계산기는 C1V1 = C2V2의 네 값 중 어느 것이든 구합니다. 연속 희석 계산기는 희석 계열의 튜브와 부피를 계획하고, 혈구계산판 계산기는 세포 수에 희석 배수를 적용합니다.