حاسبة هلام SDS-PAGE
كيف تحضّر أهلام SDS-PAGE
- اكتب نسبة هلام الفصل وكمية الهلام في كل لوح، والشيء نفسه لهلام التكديس.
- اكتب عدد الأهلام التي ستحضّرها.
- يعرض الجدول الماء والأكريلاميد وTris وSDS وAPS وTEMED لكل طبقة. أضف APS وTEMED في النهاية، قبل الصب مباشرة.
الأسئلة الشائعة
ما الوصفة المستخدمة؟
أهلام Laemmli بمحلول أصلي من الأكريلاميد/bis بنسبة 30%، وTris بتركيز 0.375 M وpH 8.8 في هلام الفصل، وTris بتركيز 0.125 M وpH 6.8 في هلام التكديس، وSDS بنسبة 0.1% وAPS بنسبة 0.1%. TEMED بنسبة 0.04% في هلام الفصل و0.1% في هلام التكديس.
أي نسبة أستخدم؟
النسب العالية تفصل البروتينات الأصغر. تقريبًا: 8% لنحو 40 إلى 200 kDa، و10% لـ 20 إلى 150 kDa، و12% لـ 15 إلى 100 kDa، و15% لـ 10 إلى 70 kDa.
كم هلامًا يحتاج اللوح؟
يعتمد على النظام وسماكة الفاصل. الهلام الصغير المعتاد بسماكة 1.0 mm يحتاج إلى نحو 5 mL من هلام الفصل و2 mL من هلام التكديس؛ والألواح بسماكة 1.5 mm تحتاج إلى نحو نصف ذلك زيادة.
هل الأكريلاميد خطر؟
الأكريلاميد غير المبلمر سام للأعصاب. ارتدِ القفازات وتعامل بحذر مع المحلول الأصلي ومحاليل الهلام قبل أن تتصلب.
مزيد من حاسبات مختبر الأحياء
حاسبة تركيز DNAحاسبة عدد نسخ DNAحاسبة الربطمحوّل RCF إلى RPMحاسبة زمن تضاعف الخلاياحاسبة عدّاد الكرياتحاسبة هاردي-واينبرغحاسبة مربع بانيتحاسبة Tm للبادئاتحاسبة ΔΔCtحاسبة تركيز البروتين (A280)حاسبة معامل الامتصاص للبروتيناتحاسبة إعادة تعليق قليلات النيوكليوتيدحاسبة MOIحاسبة زرع الخلاياحاسبة كفاءة التحويلحاسبة OD600حاسبة المنحنى القياسيحاسبة IC50حاسبة المزيج الرئيسي لـ PCRحاسبة هلام الأغاروزحاسبة المحاليل الأصليةحاسبة إعادة الحلتقدير حجم حزمة في الهلام