SDS-PAGE jel hesaplayıcı

SDS-PAGE jelleri nasıl hazırlanır

1. Ayırma jeli yüzdesini ve her plağın ne kadar jel aldığını, yığma jeli için de aynısını gir.
2. Dökeceğin jel sayısını gir.
3. Tablo her jel katmanı için suyu, akrilamidi, Tris’i, SDS’yi, APS’yi ve TEMED’i listeler. APS ve TEMED’i en son, dökmeden hemen önce ekle.

Sık sorulan sorular

Hangi tarifi kullanıyor?

%30 akrilamid/bis stoğundan Laemmli jelleri; ayırma jelinde 0,375 M Tris pH 8,8, yığma jelinde 0,125 M Tris pH 6,8, %0,1 SDS ve %0,1 APS ile. TEMED ayırma jelinde %0,04, yığma jelinde %0,1’dir.

Hangi yüzdeyi kullanmalıyım?

Yüksek yüzdeler daha küçük proteinleri ayırır. Kabaca: yaklaşık 40–200 kDa için %8, 20–150 kDa için %10, 15–100 kDa için %12 ve 10–70 kDa için %15.

Bir plak ne kadar jel alır?

Döküm sistemine ve ara parça kalınlığına bağlıdır. Tipik 1,0 mm’lik bir mini jel yaklaşık 5 mL ayırma jeli ve 2 mL yığma jeli alır; 1,5 mm’lik plaklar bunun yaklaşık yarısı kadar fazlasını alır.

Akrilamid tehlikeli mi?

Polimerleşmemiş akrilamid bir nörotoksindir. Eldiven giy ve stoğu ve donmamış jel çözeltilerini dikkatle kullan.