Calculadora de geles SDS-PAGE
Cómo preparar geles de SDS-PAGE
- Escribe el porcentaje del gel separador y cuánto gel lleva cada placa, y lo mismo para el gel concentrador.
- Escribe el número de geles que vas a preparar.
- La tabla muestra el agua, la acrilamida, el Tris, el SDS, el APS y el TEMED de cada capa. Añade el APS y el TEMED al final, justo antes de verter.
Preguntas frecuentes
¿Qué receta usa?
Geles de Laemmli con un stock de acrilamida/bis al 30%, Tris 0,375 M pH 8,8 en el gel separador y Tris 0,125 M pH 6,8 en el concentrador, SDS al 0,1% y APS al 0,1%. El TEMED es del 0,04% en el separador y del 0,1% en el concentrador.
¿Qué porcentaje uso?
Los porcentajes altos separan proteínas más pequeñas. Aproximadamente: 8% para unos 40 a 200 kDa, 10% para 20 a 150 kDa, 12% para 15 a 100 kDa y 15% para 10 a 70 kDa.
¿Cuánto gel lleva una placa?
Depende del sistema y del grosor del separador. Un minigel típico de 1,0 mm lleva unos 5 mL de gel separador y 2 mL de concentrador; las placas de 1,5 mm, aproximadamente la mitad más.
¿Es peligrosa la acrilamida?
La acrilamida sin polimerizar es neurotóxica. Usa guantes y manipula con cuidado el stock y las soluciones del gel antes de que fragüen.
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