SDS-PAGE जेल कैलकुलेटर
SDS-PAGE जेल कैसे बनाएँ
- रिज़ॉल्विंग जेल का प्रतिशत और हर प्लेट में कितना जेल लगता है, यह लिखें, और यही स्टैकिंग जेल के लिए।
- कितने जेल बना रहे हैं, यह लिखें।
- तालिका हर परत के लिए पानी, एक्रिलामाइड, Tris, SDS, APS और TEMED बताती है। APS और TEMED सबसे आख़िर में, डालने से ठीक पहले मिलाएँ।
अक्सर पूछे जाने वाले सवाल
कौन-सा नुस्ख़ा इस्तेमाल होता है?
30% एक्रिलामाइड/बिस स्टॉक से Laemmli जेल, रिज़ॉल्विंग जेल में 0.375 M Tris pH 8.8 और स्टैकिंग जेल में 0.125 M Tris pH 6.8, 0.1% SDS और 0.1% APS के साथ। TEMED रिज़ॉल्विंग जेल में 0.04% और स्टैकिंग जेल में 0.1% है।
कौन-सा प्रतिशत लूँ?
ज़्यादा प्रतिशत छोटे प्रोटीन अलग करते हैं। मोटे तौर पर: लगभग 40 से 200 kDa के लिए 8%, 20 से 150 kDa के लिए 10%, 15 से 100 kDa के लिए 12% और 10 से 70 kDa के लिए 15%।
एक प्लेट में कितना जेल लगता है?
यह कास्टिंग सिस्टम और स्पेसर की मोटाई पर निर्भर है। आम 1.0 mm मिनी जेल में लगभग 5 mL रिज़ॉल्विंग और 2 mL स्टैकिंग जेल लगता है; 1.5 mm प्लेट में लगभग डेढ़ गुना।
क्या एक्रिलामाइड ख़तरनाक है?
बिना पॉलीमराइज़ हुआ एक्रिलामाइड तंत्रिका-विष है। दस्ताने पहनें और स्टॉक तथा बिना जमे जेल घोल सावधानी से संभालें।
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