SDS-PAGE-Gel-Rechner

So gießt du SDS-PAGE-Gele

1. Gib den Prozentsatz des Trenngels und die Menge pro Platte ein, dasselbe für das Sammelgel.
2. Gib die Zahl der Gele ein, die du gießt.
3. Die Tabelle listet Wasser, Acrylamid, Tris, SDS, APS und TEMED für jede Gelschicht. Gib APS und TEMED zuletzt dazu, direkt vor dem Gießen.

Häufige Fragen

Welches Rezept wird verwendet?

Laemmli-Gele aus 30 % Acrylamid/Bis, mit 0,375 M Tris pH 8,8 im Trenngel und 0,125 M Tris pH 6,8 im Sammelgel, 0,1 % SDS und 0,1 % APS. TEMED ist 0,04 % im Trenngel und 0,1 % im Sammelgel.

Welchen Prozentsatz nehme ich?

Höhere Prozentsätze trennen kleinere Proteine. Grob: 8 % für etwa 40 bis 200 kDa, 10 % für 20 bis 150 kDa, 12 % für 15 bis 100 kDa und 15 % für 10 bis 70 kDa.

Wie viel Gel fasst eine Platte?

Das hängt vom Gießsystem und der Spacer-Dicke ab. Ein typisches 1,0-mm-Minigel braucht etwa 5 mL Trenngel und 2 mL Sammelgel; 1,5-mm-Platten etwa die Hälfte mehr.

Ist Acrylamid gefährlich?

Unpolymerisiertes Acrylamid ist ein Nervengift. Trage Handschuhe und geh mit der Stammlösung und ungehärteten Gellösungen vorsichtig um.