Calculadora de géis SDS-PAGE
Como preparar géis de SDS-PAGE
- Digite a porcentagem do gel de separação e quanto gel cada placa leva, e o mesmo para o gel de empilhamento.
- Digite o número de géis a preparar.
- A tabela lista água, acrilamida, Tris, SDS, APS e TEMED de cada camada. Adicione APS e TEMED por último, logo antes de verter.
Perguntas frequentes
Que receita é usada?
Géis de Laemmli com estoque de acrilamida/bis 30%, Tris 0,375 M pH 8,8 no gel de separação e Tris 0,125 M pH 6,8 no de empilhamento, SDS 0,1% e APS 0,1%. O TEMED é 0,04% no gel de separação e 0,1% no de empilhamento.
Que porcentagem usar?
Porcentagens mais altas separam proteínas menores. Aproximadamente: 8% para cerca de 40 a 200 kDa, 10% para 20 a 150 kDa, 12% para 15 a 100 kDa e 15% para 10 a 70 kDa.
Quanto gel uma placa leva?
Depende do sistema e da espessura do espaçador. Um minigel típico de 1,0 mm leva cerca de 5 mL de gel de separação e 2 mL de empilhamento; placas de 1,5 mm, cerca de metade a mais.
A acrilamida é perigosa?
A acrilamida não polimerizada é neurotóxica. Use luvas e manuseie o estoque e as soluções do gel com cuidado.
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