Kalkulator Gel SDS-PAGE

Cara membuat gel SDS-PAGE

1. Ketik persentase gel pemisah dan banyaknya gel per pelat, lalu hal yang sama untuk gel penumpuk.
2. Ketik jumlah gel yang akan dituang.
3. Tabel mencantumkan air, akrilamida, Tris, SDS, APS, dan TEMED untuk tiap lapisan gel. Tambahkan APS dan TEMED terakhir, tepat sebelum menuang.

Pertanyaan umum

Resep apa yang dipakai?

Gel Laemmli dari stok akrilamida/bis 30%, dengan Tris 0,375 M pH 8,8 di gel pemisah dan Tris 0,125 M pH 6,8 di gel penumpuk, SDS 0,1% dan APS 0,1%. TEMED 0,04% di gel pemisah dan 0,1% di gel penumpuk.

Persentase mana yang dipakai?

Persentase lebih tinggi memisahkan protein yang lebih kecil. Kira-kira: 8% untuk sekitar 40 sampai 200 kDa, 10% untuk 20 sampai 150 kDa, 12% untuk 15 sampai 100 kDa, dan 15% untuk 10 sampai 70 kDa.

Berapa banyak gel per pelat?

Bergantung pada sistem cetakan dan tebal spacer. Minigel 1,0 mm yang umum perlu sekitar 5 mL gel pemisah dan 2 mL gel penumpuk; pelat 1,5 mm sekitar setengahnya lagi.

Apakah akrilamida berbahaya?

Akrilamida yang belum berpolimerisasi adalah neurotoksin. Pakai sarung tangan dan tangani stok serta larutan gel yang belum mengeras dengan hati-hati.