Calculadora de master mix de PCR
Como preparar um master mix de PCR
- Digite o número de reações, o extra para perdas de pipetagem, o volume de reação e o volume de molde por reação.
- Edite os componentes conforme seu kit: cada linha é um nome, a concentração do estoque e a concentração final desejada.
- A tabela mostra o volume de cada componente por reação e para o mix inteiro, com água para completar o volume.
Perguntas frequentes
Como cada volume é calculado?
Volume por reação = concentração final ÷ concentração do estoque × volume de reação, por C1V1 = C2V2. O volume do master mix é isso vezes o número de reações mais o extra.
Por que fazer um extra?
Parte do líquido fica no tubo e nas ponteiras. 10% a mais, ou uma reação extra a cada 10, garante que o último tubo receba sua parte completa.
Meu kit é um master mix 2×. O que eu digito?
Troque as linhas por "Master mix 2 1" e seus primers; a linha da água completa o resto.
A linha da polimerase usa unidades?
Sim: digite o estoque em U/µL e o final em U/µL de reação. 0,025 U/µL são 1,25 U numa reação de 50 µL, uma quantidade comum de Taq.
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