Calcul de mix PCR
Comment préparer un mix PCR
- Saisissez le nombre de réactions, le supplément pour les pertes de pipetage, le volume réactionnel et le volume de matrice par réaction.
- Adaptez les composants à votre kit : chaque ligne contient un nom, la concentration du stock et la concentration finale voulue.
- Le tableau donne le volume de chaque composant par réaction et pour tout le mix, avec l’eau pour compléter.
Questions fréquentes
Comment chaque volume est-il calculé ?
Volume par réaction = concentration finale ÷ concentration du stock × volume réactionnel, selon C1V1 = C2V2. Le volume du mix est ce volume multiplié par le nombre de réactions plus le supplément.
Pourquoi un supplément ?
Un peu de liquide reste dans le tube et les cônes. 10 % de plus, ou une réaction de plus toutes les 10, garantit que le dernier tube reçoit sa part.
Mon kit est un mix 2×. Que saisir ?
Remplacez les lignes par « Master mix 2 1 » et vos amorces ; la ligne d’eau complète le reste.
La ligne de polymérase est-elle en unités ?
Oui : saisissez le stock en U/µL et la finale en U/µL de réaction. 0,025 U/µL font 1,25 U dans une réaction de 50 µL, une quantité courante de Taq.
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