PCR-Mastermix-Rechner
So setzt du einen PCR-Mastermix an
- Gib die Zahl der Reaktionen, den Zuschlag für Pipettierverluste, das Reaktionsvolumen und das Template-Volumen pro Reaktion ein.
- Passe die Komponenten an dein Kit an: Jede Zeile ist ein Name, die Stammkonzentration und die gewünschte Endkonzentration.
- Die Tabelle zeigt das Volumen jeder Komponente pro Reaktion und für den ganzen Mix, mit Wasser bis zum Endvolumen.
Häufige Fragen
Wie wird jedes Volumen berechnet?
Volumen pro Reaktion = Endkonzentration ÷ Stammkonzentration × Reaktionsvolumen, nach C1V1 = C2V2. Das Mastermix-Volumen ist das mal der Zahl der Reaktionen plus Zuschlag.
Warum ein Zuschlag?
Etwas Flüssigkeit bleibt in Gefäß und Spitzen. 10 % mehr oder eine zusätzliche Reaktion pro 10 sorgen dafür, dass auch das letzte Gefäß seinen vollen Anteil bekommt.
Mein Kit ist ein 2×-Mastermix. Was gebe ich ein?
Ersetze die Zeilen durch „Master mix 2 1“ und deine Primer; die Wasserzeile füllt den Rest.
Wird die Polymerase in Units angegeben?
Ja: Gib die Stammlösung in U/µL und die Endkonzentration in U/µL Reaktion ein. 0,025 U/µL sind 1,25 U in einer 50-µL-Reaktion, eine übliche Menge Taq.
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