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PCR-Mastermix-Rechner

So setzt du einen PCR-Mastermix an

  1. Gib die Zahl der Reaktionen, den Zuschlag für Pipettierverluste, das Reaktionsvolumen und das Template-Volumen pro Reaktion ein.
  2. Passe die Komponenten an dein Kit an: Jede Zeile ist ein Name, die Stammkonzentration und die gewünschte Endkonzentration.
  3. Die Tabelle zeigt das Volumen jeder Komponente pro Reaktion und für den ganzen Mix, mit Wasser bis zum Endvolumen.

Häufige Fragen

Wie wird jedes Volumen berechnet?

Volumen pro Reaktion = Endkonzentration ÷ Stammkonzentration × Reaktionsvolumen, nach C1V1 = C2V2. Das Mastermix-Volumen ist das mal der Zahl der Reaktionen plus Zuschlag.

Warum ein Zuschlag?

Etwas Flüssigkeit bleibt in Gefäß und Spitzen. 10 % mehr oder eine zusätzliche Reaktion pro 10 sorgen dafür, dass auch das letzte Gefäß seinen vollen Anteil bekommt.

Mein Kit ist ein 2×-Mastermix. Was gebe ich ein?

Ersetze die Zeilen durch „Master mix 2 1“ und deine Primer; die Wasserzeile füllt den Rest.

Wird die Polymerase in Units angegeben?

Ja: Gib die Stammlösung in U/µL und die Endkonzentration in U/µL Reaktion ein. 0,025 U/µL sind 1,25 U in einer 50-µL-Reaktion, eine übliche Menge Taq.

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