Calculadora de mezcla maestra de PCR

Cómo preparar una mezcla maestra de PCR

1. Escribe el número de reacciones, el extra para pérdidas al pipetear, el volumen de reacción y el volumen de molde por reacción.
2. Edita los componentes según tu kit: cada línea es un nombre, su concentración en stock y la concentración final que quieres.
3. La tabla muestra el volumen de cada componente por reacción y para toda la mezcla, con el agua necesaria para completar el volumen.

Preguntas frecuentes

¿Cómo se calcula cada volumen?

Volumen por reacción = concentración final ÷ concentración del stock × volumen de reacción, según C1V1 = C2V2. El volumen de la mezcla maestra es eso por el número de reacciones más el extra.

¿Por qué añadir un extra?

Parte del líquido se queda en el tubo y en las puntas. Un 10% de más, o una reacción extra por cada 10, asegura que el último tubo reciba su parte completa.

Mi kit es una mezcla maestra 2×. ¿Qué escribo?

Sustituye las líneas por «Master mix 2 1» y tus cebadores; la línea de agua completa el resto.

¿La línea de la polimerasa va en unidades?

Sí: escribe el stock en U/µL y el final en U/µL de reacción. 0,025 U/µL son 1,25 U en una reacción de 50 µL, una cantidad habitual de Taq.