Calcul de courbe étalon
Comment utiliser une courbe étalon
- Saisissez la concentration et la mesure (absorbance, fluorescence ou Ct) de chaque étalon, une paire par ligne.
- Saisissez les mesures de vos échantillons, et leur facteur de dilution si vous les avez dilués.
- L’équation de la droite et le R² s’affichent, avec la concentration de chaque échantillon dans le tableau.
Questions fréquentes
Comment la concentration est-elle calculée ?
Les étalons sont ajustés par une droite, mesure = pente × concentration + ordonnée à l’origine, par la méthode des moindres carrés. Chaque échantillon vaut (mesure − ordonnée à l’origine) ÷ pente, multiplié par son facteur de dilution.
Quel R² est suffisant ?
Au-dessus d’environ 0,99, c’est l’usage pour un dosage de protéines ou d’ADN. Une valeur plus basse évoque une erreur de pipetage, un point aberrant ou des étalons hors de la zone linéaire.
Pourquoi signale-t-il les mesures hors des étalons ?
La droite n’est connue qu’entre l’étalon le plus bas et le plus haut. Au-delà, on extrapole et le résultat est moins fiable ; diluez les échantillons concentrés et mesurez à nouveau.
La droite doit-elle passer par zéro ?
En général non : le blanc donne souvent une petite mesure. Choisissez Par l’origine seulement si le blanc est déjà soustrait et que la réponse est nulle à concentration nulle.